PRRSV GP5和M蛋白滴鼻免疫小鼠后特异性抗体的中和活性分析

许瑞勤，孙杨杨，孔令昊，刘创创，李想通，李 闻，魏凤灵，杨国宇，夏平安，张改平 (河南农业大学 牧医工程学院，河南 郑州 450002)

霍乱毒素(cholera toxin,CT)是由霍乱弧菌分泌的一种不耐热肠毒素，具有很强的佐剂作用。CT分子由1个具有毒性的27 000的A亚基(CTA)和5个完全相同的11 700的B亚基(CTB)形成的五聚体组成AB5型结构的一种六聚体蛋白[1]。A亚基具有ADP-核糖基转移酶活性，是CT的毒素活性中心。以五聚体形式存在的B亚基不仅去除了CT的毒性而且仍具有黏膜佐剂的活性，而且还可以和大部分哺乳动物细胞表面的受体神经节苷脂GM1 发生特异性结合，从而有效刺激机体分泌抗体，其特有的生物学特性使CTB具有了较好的佐剂效能[2]。

猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)入侵宿主机体主要是通过呼吸道和生殖道黏膜[3]，PRRSV感染可导致妊娠母猪的繁殖障碍以及各年龄段猪呼吸道疾病。由于PRRSV具有易变异以及非中和抗体介导的再感染等特性，使该病控制变得更加复杂。研究表明，PRRSV体液免疫中主要靠中和抗体抑制病毒的复制，PRRSV感染猪后，早期产生的抗体主要是针对N蛋白的抗体，且其无中和病毒的作用[4]；而且在很多天然感染PRRSV的猪体内，中和抗体往往产生较晚且中和效价较低。GP5蛋白是PRRSV的主要中和表位所在，但其具有变异性。抗GP5单克隆抗体能够中和病毒[5]，所以GP5蛋白成为国内外学者研发新型亚单位疫苗的首选蛋白。M蛋白保守性较强，且具有很强的免疫原性[6-7]，使其在诱导交叉保护性中和抗体上具有重要意义，所以M蛋白也成为研发新型亚单位疫苗的候选蛋白。……