罗湖区社区获得性肺炎患儿诱导痰培养及血培养病原学调查研究

韦艳红　丁燕婷

【摘要】 目的：調查罗湖区社区获得性肺炎患儿诱导痰培养及血培养病原学情况。方法：回顾性分析2018年3-12月本院收治的109例罗湖区社区获得性肺炎患儿的临床资料，所有患儿均进行诱导痰培养、血培养及药敏检测，分析罗湖区社区获得性肺炎患儿病原学特征。结果：109例患儿共检出180株菌，其中革兰阳性菌45株（25.00%），革兰阴性菌132株（73.33%），真菌3株（1.67%）。革兰阳性菌主要以金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌及肺炎链球菌为主;革兰阴性菌主要以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌及流感嗜血杆菌为主;真菌主要以白色假丝酵母菌为主。新生儿及1～3个月婴儿易感染金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌，4～12个月婴儿易感染大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌，1～3岁儿童易感染肺炎链球菌和流感嗜血杆菌，4～12岁儿童易感染肺炎链球菌。金黄色葡萄球菌对青霉素、氨苄西林、头孢噻肟、克林霉素及阿奇霉素耐药率较高;表皮葡萄球菌对氨苄西林、青霉素、头孢噻肟、阿莫西林、四环素、庆大霉素及环丙沙星耐药率较高;肺炎链球菌对阿莫西林、青霉素、四环素及阿奇霉素的耐药率较高;大肠埃希菌对氨苄西林、庆大霉素、甲氧苄啶、头孢唑林及头孢噻肟的耐药率较高;肺炎克雷伯菌对氨苄西林、头孢他啶耐药率较高;流感嗜血杆菌对氨苄西林、甲氧苄啶耐药率较高。结论：罗湖区社区获得性肺炎患儿病原菌以金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、肺炎链球菌、大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌为主，临床应根据不同年龄患儿易患病原菌选择针对性的抗生素治疗，并加强细菌耐药性监测与控制，以防止耐药菌产生。

【关键词】 社区获得性肺炎 痰培养 血培养 病原学

[Abstract] Objective： To investigate the etiology of induced sputum culture and blood culture in children with community acquired pneumonia in Luohu District. Method： The clinical data of 109 children with community acquired pneumonia in Luohu District admitted to our hospital from March to December 2018 were retrospectively analyzed. All the children were subjected to induced sputum culture， blood culture and drug sensitivity test， and the etiological characteristics of the children with community acquired pneumonia in Luohu District were analyzed. Result： A total of 180 strains of bacteria were detected in 109 children， including 45 strains （25.00%） of Gram-positive bacteria， 132 strains （73.33%） of Gram-negative bacteria and 3 strains （1.67%） of fungi. The main Gram-positive bacteria were Staphylococcus aureus， Staphylococcus epidermidis and Streptococcus pneumoniae. The main Gram-negative bacteria were Escherichia coli， Klebsiella pneumoniae and Haemophilus influenzae. The main fungi was Candida albicans. Newborns and 1-3 months infants were susceptible to Staphylococcus aureus， Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae， 4-12 months infants were susceptible to Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae. Children 1 to 3 years old were susceptible to Streptococcus pneumoniae and Haemophilus influenzae， and children 4 to 12 years old were susceptible to Streptococcus pneumoniae. Staphylococcus aureus was highly resistant to Penicillin， Ampicillin， Cefotaxime， Clindamycin and Azithromycin. Staphylococcus epidermidis was highly resistant to Ampicillin， Penicillin， Cefotaxime， Amoxicillin， Tetracycline， Gentamicin and Ciprofloxacin. The resistance rate of Streptococcus pneumoniae to Amoxicillin， Penicillin， Tetracycline and Azithromycin were higher. The resistance rate of Escherichia coli to Ampicillin， Gentamycin， Trimethoprim， Cefazolin and Cefotaxime were higher. The resistance rate of Klebsiella pneumoniae to Ampicillin and Ceftazidime were higher. The resistance rate of Haemophilus influenzae to ampicillin and methoxyphen was higher. Conclusion： Staphylococcus aureus， Staphylococcus epidermidis， Streptococcus pneumoniae， Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae are the main pathogens of community acquired pneumonia in Luohu District. Clinical should be based on the different age of children susceptible to pathogenic bacteria to choose targeted antibiotic treatment， and monitoring and control of bacterial resistance should be strengthened to prevent the emergence of drug-resistant bacteria.

[Key words] Community acquired pneumonia Sputum culture Blood culture Etiology

First-authors address： Luohu District Maternal and Child Health Hospital， Shenzhen 518000， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2020.17.020

社区获得性肺炎是在院外由多种微生物所引起的炎症。临床主要表现为咳嗽、发热等症状[1]。据统计，社区获得性肺炎是5岁儿童死亡主要原因[2]。临床常采用抗生素治疗，但近年来由于抗生素的不规范使用及滥用，导致细菌变异产生新的耐药菌株，故对诊断明确的社区获得性肺炎患儿需行痰、血培养，并根据药敏试验结果指导用药，以减少新的耐药菌株产生[3-4]。鉴于地区社区对获得性肺炎患儿诱导痰培养及血培养病原学的相关报道较少，因此本研究对本院收治的109例罗湖区社区获得性肺炎患儿的临床资料进行回顾性分析，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 回顾性分析本院2018年3-12月收治的109例社区获得性肺炎患儿的临床资料。纳入标准：（1）年龄0～12岁;（2）均符合中华医学会呼吸病学分会制定的《社区获得性肺炎诊断和指南值指南》中诊断准[5];（3）临床资料完整。排除标准：（1）合并实质性脏器严重功能不全者;（2）活动性肺结核者;（3）最近2周有住院治疗史;（4）住院前抗微生物治疗>2周。其中男64例，女45例;年龄0～12岁，平均（4.47±2.03）岁。本研究已經医院伦理委员会批准。

1.2 方法 所有患儿在无菌0.9%氯化钠溶液清洗口腔后采用电动吸痰进行细菌培养及抗菌药物敏感试验。痰培养：将痰液标本接种于血平板和巧克力平板，35 ℃，5%～7% CO2孵箱培养24 h，在巧克力平板挑取可疑菌落，按照《全国临床检验操作规程》进行操作。采用K-B法进行药敏试验：（1）从琼脂平板挑取形态相似的纯培养菌落接种肉汤培养基，并于35 ℃培养至浊度，取出调节菌液浓度至0.5麦氏单位。（2）采用无菌棉拭子浸入调好的菌悬液中，将多于菌悬液在管壁挤出，在M-H琼脂平皿上划线，旋转平皿60°后用拭子涂抹琼脂边缘。置室温3～5 min。（3）取药敏纸片贴于平板表面并轻压，每张纸片间距≥24 mm，中心距平板边缘≥15 mm，90 mm直径的平板适宜贴6张药敏纸片。（4）将贴好纸片的平板置35℃孵育18～24 h后用游标卡尺量取抑菌圈直径。结果判断：根据抑菌圈的大小（不同抗生素其抑菌圈大小的标准不一致），判断为敏感（S），耐药（R）。血培养：采取患儿血液5 mL，提取血清2 mL分装于冻存管各1 mL置于-20 ℃，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测各病原体。血清抗体检测阳性标准：间隔2～4周采集的2次标本的血清抗体滴度呈4倍或4倍以上增高或降低。

1.3 观察指标 （1）病原菌分布情况。（2）不同年龄段儿童对主要病原菌的易感性。（3）主要革兰阳性菌对抗生素的耐药率。（4）主要革兰阴性菌对抗生素的耐药率。

1.4 统计学处理 采用SPSS 20.0软件对所得数据进行统计分析，计量资料用（x±s）表示，比较采用t检验;计数资料以率（%）表示，比较采用字2检验。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 病原菌分布情况 109例患儿共检出180株菌，其中革兰阳性菌45株（25.00%），革兰阴性菌132株（73.33%），真菌3株（1.67%）。革兰阳性菌主要以金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌及肺炎链球菌为主;革兰阴性菌主要以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌及流感嗜血杆菌为主;真菌主要以白色假丝酵母菌为主。见表1。

2.2 不同年龄段儿童对病原菌的易感性 新生儿及1～3个月婴儿易感染金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌，4～12个月婴儿易感染大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌，1～3岁儿童易感染肺炎链球菌和流感嗜血杆菌，4～12岁儿童易感染肺炎链球菌，见表2。

2.3 主要革兰阳性菌对抗生素的耐药率 金黄色葡萄球菌对青霉素、氨苄西林、头孢噻肟、克林霉素及阿奇霉素耐药率较高;表皮葡萄球菌对氨苄西林、青霉素、头孢噻肟、阿莫西林、四环素、庆大霉素及环丙沙星耐药率较高;肺炎链球菌对阿莫西林、青霉素、四环素及阿奇霉素的耐药率较高，见表3。

2.4 主要革兰阴性菌对抗生素的耐药率 大肠埃希菌对氨苄西林、庆大霉素、甲氧苄啶、头孢唑林及头孢噻肟的耐药率较高;肺炎克雷伯菌对氨苄西林、头孢他啶耐药率较高;流感嗜血杆菌对氨苄西林、甲氧苄啶耐药率较高，见表4。

3 讨论

社区获得性肺炎是儿科常见疾病，近年来由于儿童呼吸系统解剖生理特点及儿童免疫功能低下和呼吸器官功能发育尚未成熟，同时由于大气环境污染，致使社区获得性肺炎发病率及死亡率呈上升趋势，严重威胁患儿生命安全[6-7]。因病原菌复杂多样，临床不规范使用抗生素可导致病原菌耐药率增加和多重耐药的产生，故调查研究社区获得性肺炎患儿病原学对治疗和降低病死率具有重要意义[8-9]。

本研究结果显示，痰培养阳性患儿109例，共检出180株菌，其中革兰阳性菌45株（25.00%），革兰阴性菌132株（73.33%），真菌3株（1.67%）。提示革兰阴性菌成为下呼吸道感染的主要病原菌，其中革兰阳性菌主要以金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌及肺炎链球菌为主，革兰阴性菌主要以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌及流感嗜血杆菌为主，真菌主要以白色假丝酵母菌为主，与国内报道相近[10]。但国外报道显示，社区获得性肺炎病原菌以病毒为主，细菌谱以肺炎球菌和肺炎克雷伯菌为主[11]。考虑其主要原因为我国痰、血培养技术条件欠佳，消耗时间较长，从而导致阳性率较低[12]。同时本研究发现，新生儿及1～3个月婴儿易感染金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌，这与新生儿及婴儿分泌型IgA、IgM及IgG水平低下有关，因IgA在黏膜免疫中发挥抗感染作用，且IgM及IgG水平较低使机体对革兰阴性菌抵抗力较差，因此容易发生感染[13]。4～12个月婴儿易感染大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌，1～3岁儿童易感染肺炎链球菌和流感嗜血杆菌，4～12岁儿童易感染肺炎链球菌，这与1岁后患儿免疫系统发育成熟有关，随着机体免疫功能的不断增强，病毒感染逐渐下降，同时说明随着年龄的增长肺炎链球菌感染呈增加趋势，因此临床应根据不同年龄易患病原菌针对性地选择抗生素治疗[14]。且本研究药敏试验结果显示，金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌均对利福平、万古霉素、左氧氟沙星、加替沙星、替考拉宁及阿米卡星敏感性较高，可作为革兰阳性菌感染的社区获得性肺炎早期选择药物，同时应注意氨基糖苷类药物对肝肾耳等不良反应。近年来国内外肺炎链球菌对青霉素、红霉素、阿奇霉素及克林霉素耐药率不断上升。且不同地区耐药特点不同[15]。本研究显示，肺炎链球菌对阿莫西林、青霉素、四环素及阿奇霉素的耐药率较高，由此可见，单独使用大环内脂类药物对肺炎链球菌患者无明显效果，临床应根据药敏试验制定治疗方案。同时本研究结果显示，大肠埃希菌对氨苄西林、庆大霉素、甲氧苄啶、头孢唑林及头孢噻肟的耐药率较高，肺炎克雷伯菌对氨苄西林、头孢他啶耐药率较高，流感嗜血杆菌对氨苄西林、甲氧苄啶耐药率较高，与Kumar等[16]报道相近，且未发现对阿莫西林、阿米卡星及哌拉西林的耐药性，可能与本院对抗生素的使用进行严格控制有关。但由于本研究为回顾性研究，样本量较为局限，且缺乏对病毒和团菌等病原体检测，研究结果代表性不够全面，期待前瞻性及多中心的研究[17-18]。

综上所示，社区获得性肺炎病情发展迅速，临床应考虑病原菌变迁和抗生素耐药等问题，且为减少抗生素滥用，应根据药敏试验制定治疗方案。

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（收稿日期：2020-03-13）（本文编辑：田婧）