茶树CsWRKYIIcs转录因子的克隆及功能分析

肖罗丹，唐磊，王伟东，高岳芳，黄伊凡，孟阳，杨亚军,2，肖斌

（1西北农林科技大学园艺学院，陕西杨凌 712100；2中国农业科学院茶叶研究所，杭州 310008）

0 引言

【研究意义】茶树（Camellia sinensis（L.）O.kuntze）起源于我国西南地区，是一种重要的叶用经济作物[1]。全国的茶树种植分为四大茶区，跨度大、范围广，茶树在生长过程中易遭受高温、高盐、干旱等非生物胁迫的伤害，如干旱胁迫使茶树叶片脱水变枯，导致茶氨酸、儿茶素等含量减少，严重影响其品质成分的积累，降低经济效益[2]。因此，鉴定出茶树中的抗性基因，对利用分子育种技术定向筛选和培育抗性品种有重要研究价值。【前人研究进展】WRKY是植物重要的转录因子家族之一，因具有高度保守的WRKY结构域得名。根据不同数量的WRKY结构域和不同类型的锌指结构将WRKY分成I、II、III家族，I家族有2个WRKY结构域和C2H2（C-X4-5-C-X22-23-H-X-H）型锌指结构；II家族有1个WRKY结构域及与I家族相同的锌指结构类型；III家族有1个WRKY结构域，且含与I、II家族不同的C2HC（C-X7-C-X23-H-X-C）型锌指结构。依据系统发育分析和氨基酸序列差异，II家族可进一步分为IIa—e等5个亚家族，其中IIc亚家族具有1个高度保守的WRKY结构域和C-X4-C-X22-23-H-X-H型锌配体[3-5]。近年来，大量研究表明，植物中不同WRKY家族成员受病菌、干旱、高盐、高温和外源激素等诱导表达，参与多种植物对生物或非生物胁迫的抗性[6-10]，其中IIc亚家族成员也参与对多种胁迫的响应过程，如拟南芥AtWRKY8、AtWRKY48、AtWRKY50、AtWRKY51和AtWRKY57对茉莉酸和水杨酸介导的信号通路有应答作用[11]，棉花GhWRKY33、GhWRKY39、GhWRKY93、GhWRKY110和GhWRKY114参与低温、盐碱、干旱、外源脱落酸（ABA）等非生物胁迫的响应[12]等。【本研究切入点】目前，茶树中的WRKY基因家族已有报道[13-15]，研究了不同WRKY的功能[16-22]，表明WRKY与茶树的生长发育和胁迫响应密切相关。……