辣木的染色体制片优化及核型分析

陈盈盈 官锦燕 谭嘉娜 罗剑飘 黄海英 文明富 罗青文

摘  要：以辣木分生组织为材料，采用酶解去壁低渗法制片，探讨不同取材部位、预处理方式和酶解时间对辣木染色体制片的影响，并对其进行核型分析，以期为辣木的起源、演化及遗传育种提供一定理论依据。结果表明：以辣木新枝茎尖为最佳取材部位，用饱和对二氯苯预处理2 h，再用4%纤维素酶和5%果胶酶混合物酶解4 h，制片所得染色体效果最佳。核型分析表明，辣木染色体属于小染色体，有28条，核型公式为2n=2x=2n=28m，属于1B类型，核型不对称系数60.29%，核型对称程度较高，这表明辣木在进化中可能处于比较原始类型。

关键词：辣木;染色体制片;核型分析;茎尖中图分类号：Q943.2;S31      文献标识码：A

Optimization of Chromosome Sectioning and Karyotype Analysis ofMoringa oleifera

CHEN Yingying， GUAN Jinyan， TAN Jiana， LUO Jianpiao， HUANG Haiying， WEN Mingfu， LUO Qingwen^*

Guangdong Bioengineering Institute （Guangzhou Sugarcane Industry Research Institute） / Guangdong Key Laboratory of Sugarcane Improvement and Biorefinery， Guangzhou， Guangdong 510316， China

Abstract： Chromosome mounting technique was optimized to explore the chromosome karyotype of Moringa oleifera， to provide important cytological evidences for the study of the evolution， evolutionary characteristics and genetic regularity of camphor plants. The effects of different sampling position， pretreatment methods and enzymatic hydrolysis time on the production ofM. oleiferawere discussed by the enzymatic dissociation wall low permeability method， microscope observation and photography. The observation showed that the best sampling position was the tips of new branches. Samples pretreated in p-dichlorobenzene for 2 h， dissociated in 4% cellulase and 5% pectinase for 4 h could achieve the optimal experimental results. Karyotype analysis showed that the chromosome number was 28， and the karyotype formula was 2n=2x=2n=28m. The results demonstrated that the asymmetry indexes was 60.29%， and the karyotype was 1B type， suggesting thatM. oleiferawas possibly relatively primitive in the evolution.

Keywords： Moringa oleifera; chromosome sectioning; karyotype analysis; stem tip

DOI： 10.3969/j.issn.1000-2561.2020.06.015

辣木（Moringa oleifera Lam），又稱鼓槌树，属辣木科（Moringaceae）辣木属（Moringa）多年生乔木，原产于印度和非洲，辣木科仅有1属14种[1^-2]。辣木含有丰富的纤维、维生素、矿物质、蛋白质、氨基酸、多糖、辣木素、皂苷、酚类和活性酶类等成分，具有消炎、抑菌、降血糖、降胆固醇、凝血、抗氧化、抗肿瘤和癌症等功能[3-4]。因此，辣木又被誉为“神奇之树”和“母亲最好的朋友”。很多发展中国家利用辣木来改善儿童营养不良，辣木具有食用、园林造景、工业、药用等多种用途[5]。

染色体核型分析技术能明确识别各个染色体的特征，有助于基因定位的研究，它是细胞遗传学的一项基本技术，也是染色体工程、细胞分类学和植物育种学一个不可缺少的手段[6-7]。目前，辣木细胞学上的研究仅局限于辣木染色体数量和倍性的研究。……