FKBP38蛋白对人源子宫内膜癌细胞增殖及侵袭的调控

闫云静，王 帅，穆云萍，赖姨梅，李芳红

(1.广东工业大学生物医药学院，广东 广州 510006；2.赣南医学院第一附属医院病理科，江西 赣南 341000)

子宫内膜癌(endometrial carcinoma，EC)是源于子宫内膜上皮的妇科恶性肿瘤，其发病率在女性肿瘤中位于第六位[1]。如能早期诊断，子宫内膜癌病人具有良好的预后结果，但仍有15%～25%患者就诊时已是晚期，诊断晚期或复发病例的中位生存时间不超过1年[2]。因此，对于EC的筛查、诊断以及治疗的分子新靶点及机制的研究尚有许多问题有待解决。

FK506结合蛋白38(FK506-bindingprotein 38，FKBP38)作为免疫亲和素的一员，与癌症发生可能有密切关系。FKBP38是哺乳动物的雷帕霉素靶标(mammalian target of rapamycin，mTOR)内源性抑制剂，可通过与mTOR 相结合来抑制mTOR的下游通路[3]。研究表明[4]，在高转移乳腺癌细胞4T1及黑色素瘤细胞B16-F10中，FKBP38发挥着抑制肿瘤转移的作用。此外，前期研究发现，FKBP38蛋白与多种癌症发生发展具有一定相关性[5-6]，进一步表明FKBP38蛋白可能在抑制癌细胞增殖活性或抑制细胞转移等方面发挥着重要作用。

本研究首次检测了不同分级、不同分期子宫内膜癌细胞中FKBP38蛋白表达水平变化，并通过在细胞水平过表达FKBP38研究其对子宫内膜癌细胞AN3Ca的影响。为进一步探讨FKBP38对于癌症的作用机制奠定基础。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1细胞及病毒 人源子宫内膜癌细胞Ishikawa(Grade 1)，RL95-2,Hec-1-A，Hec-1-B(Grade 2),AN3Ca (Grade 3) 均购美国细胞研究库(American Type Culture Collection,ATCC)。FKBP38过表达慢病毒载体购自广州赛业公司，慢病毒载体为LV-EF1a>hFKBP38 [NM-012181.4]-CMV>eGFP/T2A/Puro 和LV-CMV>eGFP/T2A/Puro(以下分别标为FKBP38及Vector)。慢病毒中包括FKBP38全长cDNA，所有结构都经DNA测序验证，转染效果经实时定量PCR(real-time quantitative PCR，RT-qPCR)及免疫印迹(Western blot)验证。

1.1.2试剂 RPMI1640(Lot:1976019)，DMEM(Lot:2105326)，DMEM-F12(1973914)，McCoy’s 5A(Lot:SLBN4158V)，胎牛血清……