重组鸡干扰素α 生物学活性测定方法的研究及其验证

高应瑞，刘珂飞，孟铁健，徐 鑫

（天津生机集团股份有限公司 300384）

干扰素(IFN)是一类具有抗病毒，影响细胞生长、分化和调节免疫功能等活性的蛋白质。 根据干扰素的氨基酸结构、抗原性和细胞来源，可将其分为三类：IFN-a、IFN-β 和IFN-γ。据资料报道，实验证明，重组的鸡α 干扰素在抵抗水泡性口炎病毒、劳斯肉瘤病毒、新城疫病毒、传染性法氏囊病病毒、传染性支气管炎病毒、马立克病毒、禽流感病毒等，都有明显的效果，能显著抑制病毒的生长[1-4]。

2014 年,程福亮等人在重组鸡α-干扰素的表达及其生物活性的初步研究中，应用在CEF/VSV 细胞系上测定了重组鸡α-干扰素的抗病毒效价为1.5×210 U/mg 左右[5]；2018 年，赵泽在鸡、羊λ3-干扰素在家蚕中的表达及其抗病毒活性检测中，采用微量细胞病变抑制法在VSV-GFP 系统上检测所表达的重组干扰素抗病毒活性,根据Reed-Muench 法计算效价[6]。 范逸文在鸡INFγ-C3d 在毕赤酵母中的表达及抗病毒活性测定中将真核表达的重组蛋白chIFN-γ 和chIFN-γ-C3d 以及实验室保存的原核表达的重组蛋白chIFN-γ 和chIFN-γ-C3d 进行鸡胚内和鸡胚成纤维细胞(CEF)抗病毒活性比较[7]；王朋在对鸭α、γ、λ 干扰素在家蚕中的表达及其抗病毒活性检测研究中， 同样采用的细胞病变抑制法来测定器干扰素的生物活性， 采用的病毒体系为VSV 病毒[8]。 邹欢在对鸭α-干扰素的真核与原核表达及生物活性的比较研究中，同样适用了VSV 病毒体系来测定干扰素生物活性[9]。

目前我国尚无重组鸡干扰素α 生物学活性测定方法国家标准，由农业农村部主编的《中华人民共和国兽用生物制品质量标准》(2001 版)猪白细胞干扰素[10]、《中国药典》“注射用重组人干扰素α1b”、“重组人干扰素α1b 注射液”都是采用细胞病变抑制法测定生物学活性[11]。……