谷氨酰胺和丙酮酸钠对NK-92 细胞体外扩增的影响

应丹妮, 陈焕芸, 付 岩, 蔡海波, 谭文松

(华东理工大学 生物反应器工程国家重点实验室, 上海 200237)

1 前 言

免疫效应细胞由于其独特的杀瘤能力和治疗优势使其在肿瘤疾病治疗中备受瞩目[1-2]。在治疗过程中，为了获得满意的临床效果，需要分离患者自体免疫效应细胞通过体外扩增技术获得符合临床要求的细胞数量。由于从肿瘤患者体内难以采集大量免疫效应细胞，且收获的细胞质量受患者身体状况影响很大，常常无法实现有效扩增，不仅使患者遭受巨大痛苦，也影响治疗效果[3-4]。因此，如何提高免疫细胞体外扩增效果并维持其杀伤活性是亟待解决的问题[5-7]。

氨基酸作为哺乳动物细胞培养基中的重要成分，其不仅是细胞增殖所需生物大分子的合成原料，某些氨基酸也可作为能源物质为细胞体外扩增提供ATP，除此之外，还可以作为嘌呤、嘧啶、氨基糖和抗氧化剂合成的底物，参与其他生物合成途径去维持细胞的完整和功能[8]。研究发现，当免疫效应细胞被激活时，抑制氨基酸转运蛋白的表达从而阻碍氨基酸的摄取时，会抑制它的扩增和功能[9-13]。同时丙酮酸是多种氨基酸合成的起始化合物，免疫效应细胞受到刺激时会通过丙酮酸羧化酶加速丙酮酸氧化以促进免疫细胞的增殖[14]。由此可见，优化培养基中氨基酸种类和浓度是免疫细胞体外扩增过程中的关键环节。而有血清培养基成分复杂，现有商业化无血清培养基中的氨基酸浓度通常也是保密的，无法使用现有的培养基进行优化以适满足细胞需求[15]。……