刘文娟 毛洪京 余正和 刘义 杨莉莉 韦又丹 邵琼琰
失眠与焦虑有显著关联[1-4],失眠患者可表现为焦虑,而焦虑患者多有失眠,两者具有双向因果关系。这种关联可能与单胺类神经递质如血清5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素、神经肽等有关[5]。但由于焦虑的复杂性和异质性,使得睡眠剥夺所致的焦虑相关研究结果缺乏一致性[6]。本研究应用多平台水环境法建立快速眼动期(repid eyes movement,REM)睡眠剥夺模型,拟通过量化的行为学方法观察REM睡眠剥夺诱导大鼠焦虑相关自我修饰行为指标以及与血清5-HT浓度的相关性,现将结果报道如下。
1.1 实验动物和分组 健康8周龄Sprague-Dawley雄性SPF级大鼠24只,均购自浙江省医学科学院,动物合格编号:SCXK(浙)2014-0001,体重(210±20)g。将 24只大鼠按随机数字表法分为睡眠剥夺组和对照组,每组12只,本研究经本院动物实验伦理委员会批准。
1.2 主要试剂和仪器 5-HT试剂盒购自南京建成生物工程研究所;视频跟踪系统Noldus Information Tech(系统版本Etho Vision XT 8.0)购自荷兰Wageningen公司。
1.3 实验方法 两组大鼠购回后熟悉环境1周,饲养室温(22±2)℃,相对湿度(55±5)%,昼夜 12 h循环,动物随意进食、饮水,定期清洗消毒。开始造模前使用视频跟踪系统对两组大鼠均进行旷场(open field,OF)试验评定,每只动物记录1次,观察两组大鼠间是否存在组间差异。对照组大鼠常规饲养,不予干扰睡眠。建立一个改良的多平台水环境,睡眠剥夺组采用72 h REM睡眠剥夺方法诱导大鼠焦虑样行为[5]:1个水族箱里放6只同一笼子里的大鼠,水族箱包含10根柱子(平台直径为5 cm,高于水平面2 cm),每根柱子相距7 cm(边缘到边缘),在恒温的室内环境里通过REM睡眠剥夺诱导大鼠焦虑样行为;……