单宁酶固液发酵对比试验

刘会 周瑞琪 金伟

摘要    通过对比单宁酶的液体发酵和固体发酵发现，固体发酵方式潜力较大、成本低、产率高，且充分利用了农林业废弃物资源，有利于环境和能源的可持续发展。

关键词    单宁酶;固体发酵;液体发酵;农林废弃物

中图分类号    TQ925        文献标识码    A

文章编号   1007-5739（2020）15-0228-02                                                                                     开放科学（资源服务）标识码（OSID）

Abstract    By comparing the liquid fermentation and solid fermentation of tanninase， it was found that solid fermentation had great potential， low cost and high yield， and made full use of agricultural and forestry waste resources， which was conducive to the sustainable development of the environment and energy.

Key words    tannase; solid fermentation; liquid fermentation; agricultural and forestry waste

单宁酶可用于处理茶饮料“冷后浑”、啤酒沉淀、果汁果酒变质等问题，广泛应用于食品、饮料、制革、化妆、医药等行业[1-2]，近年来还用于医药中间体——没食子酸和相关精细化学品的制备[3-4]。

单宁酶的发酵生产有液体发酵和固体发酵2种方式。液体发酵是传统的微生物发酵方法，具有均一性好、工艺易控制等优点;固体发酵也有其特有的优势，比如培养基成本低、设备和技术较简单、能耗低等。本文对2种发酵生产单宁酶的工艺进行全面的比较，以期为现代发酵工艺研究提供参考。

1    材料与方法

1.1    试验材料

供试菌株：黑曲霉TmF3，由中科院强磁场与离子束物理生物学重点实验室诱变获得。

产孢培养基：PDA培养基。

种子培养基：葡萄糖12 g/L，CaCO3 10 g/L，用改良Mandels营养盐液配制[5]。

液体发酵培养基：籼米粉25 g/L，单宁酸10 g/L，CaCO3 2.5 g/L，（NH4）2SO4 5.0 g/L，KH2PO4 1.5 g/L，MgSO4 0.15 g/L。

固体发酵培养基：250 mL三角瓶中加入稻壳4.4 g、麸皮0.5 g和五倍子粉1.0 g，液固比2∶1，营养盐溶液组成为（NH4）2SO4 21 g/L，MgSO4·7H2O 1.0 g/L，NaCl 1.0 g/L。

1.2    试验方法

1.2.1    孢子悬浮液配制。从产孢培养基上刮取黑曲霉孢子制成孢子悬液。

1.2.2    液體发酵。取1 mL孢子悬液（约含5.3×107个孢子）接种于含40 mL种子培养基的250 mL三角瓶中，30 ℃、200 r/min培养12 h。取2 mL种子液接种于含50 mL液体发酵培养基的250 mL三角瓶中，30 ℃、180 r/min培养80 h。……