20种茯苓菌株的亲缘关系分析△

金文松，刘文君，夏俊慧，李长乐，李赣新，都新荣，李佳欢，3，胡开辉，3*，张重义

1.福建农林大学 生命科学学院，福建 福州 350002；2.福建农林大学 农学院，福建 福州 350002；3.福建农林大学 菌业研究院，福建 古田 352200

目前茯苓菌核资源主要仍以人工椴木栽培获得，这种传统获取茯苓药用资源方式存在三方面问题：第一，以消耗大量林业资源为代价，使得菌林矛盾日益尖锐化；第二，生产模式易受生产环境的影响；第三，劳动密集型生产方式。前人研究结果表明茯苓菌核主要药效成分为茯苓三萜与茯苓多糖。应用茯苓菌丝液体发酵策略获取茯苓药用成分成为当前的一个研究热点。本课题组前期研究结果表明，16种菌株生长速度、生物量、胞内药效成分均具有一定的差异性，它们应属于不同的茯苓菌株[1]。基于当前发酵条件，基于当前发酵条件，遗传育种是获取菌丝生物量高、胞内药效成分含量高的优质发酵出发菌株的一条途径，尽管当前茯苓性模式与生活史还存在较大的争议[2-4]。

明确各菌株之间的亲缘关系远近是遗传育种成功的基本条件之一。DNA分子标记因其稳定性好、实验成本低、操作容易等优点，被广泛用于种质资源研究、遗传图谱构建、基因标记、遗传多样性分析、系统发育分析、辅助育种等研究工作[5]。在茯苓菌株亲缘关系鉴定方面，Interanl Trasncribed Spacer(ITS)序列分析、28S rRNA序列分析[6-8]、Random Amplified Polymorphic DNA(RAPD)标记[9-10]、Sequence-related Amplified Polymorphism(SRAP)标记[11]、Simple Sequence Repeats(SSR)标记[12]均有被用于茯苓菌株间遗传关系分析的报道。简单重复序列间扩增(ISSR)标记是基于SSR标记发展来的分子标记技术[13]，已被更广泛应用于茯苓菌株种质资源分析领域[14-16]，鉴定其他中药亲缘关系[17-20]。……