长链非编码RNA FOXD2-AS1对胃癌细胞增殖、侵袭和转移的影响及其机制

0 引言

胃癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一，Bray等[1]对全球185个国家36种癌症进行统计分析显示：胃癌每年新发病例约100多万，约占癌症新发病例6%，居恶性肿瘤中第六位。中国是胃癌高发国家，每年新发病例数约40万，占全世界40%左右[2]。目前胃癌在全球范围内呈高发趋势，主要集中于中国、日本、韩国等东亚国家，已经严重威胁到了人类的健康[3]，探究促进胃癌发生发展的新机制，探索胃癌治疗的新方法意义重大。

长链非编码RNA（long-chain non-coding RNA,lncRNA）是长度在200～100 000 nt之间的RNA分子，近年来越来越多的研究发现其在染色体沉默、染色质表观遗传学修饰、基因转录、蛋白翻译及定位等各方面发挥了重要的作用[4]。据文献报道：lncRNA FOXD2-AS1在结直肠癌[5]、食管癌[6]、肺癌[7]、肝癌[8]等多种癌症中高表达，并参与肿瘤的发生、增殖、迁移、侵袭及化疗抵抗等生物学过程。本研究通过临床组织标本验证lncRNA FOXD2-AS1的表达情况与患者临床病理资料的关系，并在体外实验中研究其在促进胃癌发展的作用及可能的机制。

1 材料与方法

1.1 实验材料

人正常胃癌上皮细胞系GES-1、人胃癌细胞系BGC-823、AGS、MGC-803、MKN45、MKN-74由湖南省中医药大学基础医学院实验室馈赠，E-Cadherin（Cat:10204-MM08）及N-cadherin（Cat:11039-R020）抗体购自义翘神州有限公司、Vimentin抗体购自美国CST公司（#5741）、β-catenin（ab32572）及Cyclin-D1（ab16663）抗体购自美国Abcam公司，GAPDH（Cat:10494-1-AP）一抗购自美国Proteintech公司，鼠二抗及兔二抗均购自上海优宁维生物公司，RPMI1640及胎牛血清（FBS）均购自于以色列BI公司，RNA提取试剂盒、反转录试剂盒及qRT-PCR试剂盒均购自北京全式金生物技术有限公司，RNA保护液及转染试剂Lipofectamine3000 Transfection Reagent购自美国赛默飞公司，lncRNA FOXD2-AS1小干扰RNA序列及对照序列均由苏州吉玛基因股份有限公司合成，GAPDH及lncRNA FOXD2-AS1引物由湖南擎科生物技术有限公司合成。……