邓颖,黎金凤,陈志雄,王晨秀,胡雅琴,黄水金,刘精东,程宗佑,霍亚南
作者单位:江西省人民医院、南昌大学附属人民医院内分泌科,江西 南昌330000
糖尿病是一种由遗传和环境因素共同作用引起的糖代谢紊乱的内分泌综合征[1-3]。糖尿病可有多种并发症,肾、神经、心血管、眼等器官的病变已广为人知,而糖尿病合并骨质疏松的发生率也明显增加[2,4-5]。1/2 以上的糖尿病病人骨密度降低,1/3病人被诊断为骨质疏松[2,4-5]。因此探讨糖尿病合并骨质疏松的发病机制及治疗手段意义重大。胰高血糖素样肽-1(GLP-1)是一种主要由肠道L细胞产生的肽类激素,具有保护胰岛β细胞功能,对糖尿病小鼠具有保护作用,也对骨质疏松大鼠具有改善作用,从而提示GLP-1 可能对糖尿病合并骨质疏松大鼠具有保护作用[6-7]。因此本研究于2018 年8—12月将通过原代培养正常大鼠和2 型糖尿病(T2DM)大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),并利用GLP-1 干预BMSCs,探讨GLP-1 对糖尿病大鼠BMSCs 成骨及成脂的作用。
1.1实验材料20 只(200±20)g、4 周龄清洁级的雄性SD大鼠,购于湖南斯莱克景达实验动物有限公司,生产许可证号:SCXK(湘)2016-0002,本研究符合一般动物实验伦理学原则。
1.2实验试剂与仪器DMEM高糖培养基(gibco公司);胰蛋白酶-乙二胺四乙酸消化液(Solarbio 公司);青链霉素混合液(100×)(Solarbio);成骨诱导液(RASMX-03021-175,cyagen);成 脂 诱 导 A 液(RASMX-03031-175,cyagen);成 脂 诱 导 B 液(RASMX-03032-175,cyagen);利拉鲁肽注射液(诺和力公司);茜素红染色试剂盒(南京凯基生物科技发展有限公司);GLP-1(7-36)购于美国sigma 公司,磷酸缓冲盐溶液(PBS)溶解制成所需浓度。光学相差显微镜(日本OLYMPUS公司);……