髓样分化因子88对姜黄素诱导肝星状细胞凋亡的影响分析

广州市红十字会医院（510240）童巧勤

肝脏纤维化是肝脏自身对一系列慢性刺激作出的自我修复反应，目前已知肝脏纤维化的中心环节是肝星状细胞的增殖与活化[1]。现有研究表明，姜黄素促进肝脏星状细胞的凋亡从而起到抗肝纤维化的目的，其主要可能机制是姜黄素能够抑制星状细胞Ⅰ型胶原蛋白α1的表达以及其他一系列的信号通路的改变，其中较为重要的是髓样分化因子88（MyD88）依赖性信号通路，而MyD88是该信号通路中的一项重要蛋白[2]。而MyD88是否在姜黄素抑制星状细胞的凋亡过程中起到一定作用，目前尚未可知，本研究即探究MyD88对姜黄素抑制星状细胞的凋亡的影响。

1 资料与方法

1.1 基本资料 本次研究所用到的主要试剂与材料有肝星状细胞株HSC-T6、姜黄素、MyD88 siRNA、特级新生小牛血清、胰蛋白酶、MyD88抗体、一抗二抗剥脱液等。其来源统计如附表1。

1.2 方法 细胞培养：采用大鼠肝星状细胞株HSC-T6，细胞株培养在含 100 U/ml青霉素、100U/ml链霉素、10%胎牛血清的DMEM培养液中。细胞培养箱条件为37℃，含有5%CO2。以下所有实验用细胞均取对数生长期细胞。

细胞传代：待培养瓶中的细胞生长至约90%融合时，进行细胞传代。从培养箱中取出培养瓶，倒掉培养液后，向瓶内加入1ml消化液（0.25%胰蛋白酶）轻轻摇动培养瓶，然后倒掉消化液，再加入1ml新的消化液，轻轻摇动后再倒掉大部分消化液，仅留少许进行消化。消化2～5分钟后把培养瓶置于倒置显微镜下进行观察，发现胞质回缩，细胞间隙增大后，立即加入含血清的培养液终止消化。……