黄连上清片微生物限度检查法的建立

张秀花，刘艳平，曲国晶

(菏泽市食品药品检验检测研究院，山东 菏泽)

0 引言

黄连上清片收载于《中华人民共和国药典》(以下简称：《中国药典》)2015年版一部[1]，清风清热、泻火止痛，临床应用广泛。由于黄连上清片中多种药材如黄连、黄芩、大黄、连翘、栀子等均具有明显的抗菌活性[2-10]，进行微生物限度检查时，需要首先消除样品本身的抑菌作用，才能使被检生物能够正常繁殖[11]。作者对6家生产企业6个批次的样品进行试验，结果微生物计数采用增加稀释液法，控制菌检查采用常规法，该方法操作简单，重现性好，可供其他实验室参考使用。

1 仪器与材料

1.1 样品

安徽九方制药有限公司(批号：190401)，福建乐尔康药业

有限公司(批号：190128)，河南金鸿堂制药有限公司(批号：20181105)，洛阳天生药业有限责任公司(批号：190405) 乐氏同仁三门峡制药股份有限公司(批号：20190107)，仲景宛西制药股份有限公司(批号：20191101)。

1.2 培养基与稀释液

胰酪大豆胨琼脂培养基TSA(批号：190518)，胰酪大豆胨液体培养基培养基TSB(批号：190712)，沙氏葡萄糖琼脂培养基 SDA(批号：190625)，肠道菌增菌液 EE(批号：180222)pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液(批号：190206)等均由北京陆桥技术股份有限公司提供。

2 方法与结果

2.1 菌液制备

按药典要求[12]将5种菌株依法制成不大于1000cfu/mL的菌液。

2.2 供试液制备

取“1.1”项下样品10g，研细，加入“1.3”项下稀释液至100mL，制成1:10 供试液；依法制成1:20、1:50、1:80[13]、1:100、1:1000 的供试液。

2.3 微生物计数试验

2.3.1 常规法

取“2.1”项下菌液0.1mL至9.9mL“2.2”项下1:10供试液中，为试验组；取稀释液0.1mL至9.9mL“2.2”项下1:10供试液中，为供试品对照组；取“2.1”项下菌液0.1mL至9.9mL稀释液中，为菌液对照组。……