响应曲面法优化提取柴胡总皂苷的工艺

姬海刚，杨秀芳，2，惠昱昱，郭林新

(1.陕西科技大学 化学与化工学院，陕西 西安 710021；2.陕西科技大学 陕西省轻化工助剂重点实验室，陕西 西安 710021)

柴胡为伞科植物柴胡(BupleuremChinenseDC.)或狭叶柴胡(BupleuremscorzonerifoliumWilld)的干燥根，是常用的传统中药[1-3]，东北和陕西等地是柴胡的主要产区[4]。柴胡具有疏散退热和疏肝解郁等功效[5]，临床上用于感冒发热症状[6]。皂苷是柴胡中的主要生物活性成分之一。但是目前对秦岭太白山区柴胡皂苷的提取报道很少。本文采用乙醇加热回流提取法通过Design-Expert软件设计响应曲面提取柴胡总皂苷[7],为合理开发该地区柴胡的药用价值提供参考。

1 实验部分

1.1 材料与仪器

柴胡，采自陕西太白山区，经西北农林科技大学林学院康永祥教授鉴定为柴胡 (BupleurumChinenseDC.)；香草醛，高纯级；柴胡皂苷a，色谱纯；乙醇、甲醇、冰乙酸、高氯酸等均为分析纯。

723N可见分光光度计；Cary 5000 紫外-可见-近红外分光光度计；DFY-200C高速万能粉碎机；DZKW-D-4 电热恒温水浴锅；RE-52A旋转蒸发器。

1.2 实验方法

柴胡粉碎过40目筛。称取适量的柴胡粉末，置于圆底烧瓶，加入浓度70%的乙醇溶液，料液比 1∶20 g/mL，加热回流，提取3 h。趁热过滤，收集滤液，减压回收乙醇，得浸膏。测定柴胡皂苷含量，计算柴胡总皂苷的得率(%)。

柴胡总皂苷得率=(提取液中柴胡皂苷含量×供试品溶液体积)/柴胡质量×100%

1.3 分析方法

1.3.1 供试品溶液的制备 定量称取浸膏，用甲醇定容于50 mL的容量瓶，4 ℃保存备用。

1.3.2 对照品溶液的制备 精密称取柴胡皂苷a标准品2.4 mg，用甲醇定容于10 mL容量瓶中。

1.3.3 检测波长的确定 精密移取对照品溶液200 μL，以甲醇为空白对照，水浴挥干溶剂，加入新配制的5%香草醛-冰醋酸溶液200 μL，高氯酸800 μL，在60 ℃水浴中放置15 min。……