软坚护肝片的药理学作用及其在肝脏疾病治疗中的实验和临床应用研究概述▲

梁雪婧 梁水庭 蒋汶洪 杨晗 覃晓

广西医科大学第一附属医院，南宁市 530021

【提要】 肝脏是人体内最大的内脏器官，具有复杂的结构和生理功能。肝炎会导致肝脏慢性损伤并逐渐演变为肝纤维化、肝硬化、肝癌甚至危及患者生命，其中肝纤维化是肝硬化发生发展的必经病理过程，预防和抑制肝纤维化的进展是延缓肝硬化和肝癌患者病情发展、延长患者生存时间和改善患者生活质量的有效方法。软坚护肝片是运用现代技术制成的复方中药制剂，它具有良好的抗肝纤维化作用，本文就软坚护肝片的药理学作用及其在肝病治疗中的实验研究和临床应用概况进行了综述。

肝脏是人体内最大的内脏器官，具有复杂的结构和生理功能。肝脏疾病尤其是肝炎是国内外共同面临的公共健康问题。我国是病毒性肝炎大国，尤其是乙型病毒性肝炎，2004～2013年我国乙型病毒性肝炎年平均发病率为80.6308/10万[1]。肝炎会导致肝脏慢性损伤逐渐演变为肝纤维化、肝硬化、肝癌甚至危及患者生命，肝纤维化是肝硬化发生发展的必经病理过程，预防和抑制肝纤维化的进展是延缓肝硬化和肝癌患者病情发展，延长患者生存时间和改善生活质量的有效方法。随着中医的发展，肝病中医药治疗(包括肝病毒感染、肝纤维化、肝癌)取得了长足的进步[2-4]。软坚护肝片是运用现代技术制成的复方中药制剂，含有山豆根、五味子、赤芍、黄芩等12味中药成分，能通过抑制肝胶原纤维合成、抗氧自由基、抑制脂质过氧化作用而发挥抗肝纤维化的作用，甚至能延长肝癌患者术后生存时间[5-6]。本文就软坚护肝片的药理学作用及其在肝病治疗中的实验和临床应用研究概况综述如下。

1 软坚护肝片的药理作用

软坚护肝片是由山豆根、虎杖、夏枯草、黄芩、黄芪、女贞子、赤芍、丹参、五味子、苦参碱、三七、山楂等12味中药构成。方中丹参活血散瘀，虎杖清热解毒、散瘀利湿，为君药；黄芩、赤芍清热凉血散瘀，三七活血散瘀，滋而不腻，逐瘀散结，为臣药；夏枯草清火散结，黄芩补气益中，配以山豆根使温补变清补，避免了补气助火，化火灼阴，发挥气运血行作用；山楂健胃、行气散瘀，砂仁辛温、化湿温脾，可用于湿油中阻、脾胃虚寒，为佐药，可除纳差、便溏；五味子甘温，收敛固涩、益气生津，女贞子滋阴补肾，两者归肝肾经，为使药。诸位合用具有活血化瘀，软坚散结和清热解毒的作用，在肝脏疾病特别是肝炎、肝纤维化和肝癌的治疗中均得到了不同程度的应用[7-8]。

软坚护肝片含药血清培养人肝细胞癌G2细胞株实验结果表明，软坚护肝片能抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡，而且呈剂量依赖效应，与促凋亡蛋白Bax表达上调，抗凋亡蛋白Bcl-2表达下调相关[9]。肝星状细胞培养实验结果表明，软坚护肝片能抑制细胞的增殖[10]。肝星状细胞是肝损伤时细胞外基质来源的主要细胞，其在肝纤维化发生发展和逆转过程中起关键作用，抑制肝星状细胞的活性可以显著抑制肝纤维化进程，软坚护肝片可通过调控肝星状细胞调控肝纤维化发展[11-12]。实验研究发现，软坚护肝片对肝星状细胞中的PDGFR-β、TGF-β1、Smad3等基因表达无明显影响，而这些基因表达与肝脏胶原纤维含量呈正相关，是肝脏纤维化进程中的重要信号通路基因[10，13]。梁水庭等[14]报道，应用不同剂量的软坚护肝片药液干预HBV-DNA转染的HepG 2.2.15细胞株发现，软坚护肝片能抑制其生长及HBsAg和 HBeAg的产生。赤芍、山豆根、 虎杖、 夏枯草、黄芩是软坚护肝片的主要成分，这些成分共同作用可以抑制乙肝病毒核糖核酸多聚酶(DNAP)的形成[15]，提示软坚护肝片在细胞水平具有抗乙肝病毒的作用。

肝纤维化是肝损伤后机体自我修复的过程，调控肝损伤后肝再生是防治肝纤维化的新策略[16-17]。软坚护肝片在抗肝损伤中扮演着重要角色。莫凤珍等[18]报道，使用软坚护肝片治疗刀豆蛋白A诱导的免疫性肝损伤小鼠发现，小鼠血清中ALT、AST、TNF-α、IFN-γ水平及肝组织中MDA、NO含量降低、肝组织SOD和GSH水平升高。莫凤珍等[5]报道，软坚护肝片能减轻在四氯化碳对乙酰氨基酚(AP)和D-半乳糖胺盐酸盐构建的化学肝损伤模型小鼠肝细胞的损伤程度，降低血清ALT、AST、ALP水平和肝组织中MDA含量，增加肝组织SOD、GSH、GSH-PX活性，其护肝机制可能与抗脂质过氧化有关。在CCl4、对硫代乙酰胺、D-氨基半乳糖诱导的大鼠急性肝损伤模型中，软坚护肝片能抑制大鼠血清ALT活性，但对正常大鼠血清ALT活性没有影响，而ALT是肝细胞损伤的标志物，软坚护肝片可通过影响ALP活性调控肝细胞损伤[14，19]。研究还发现，软坚护肝片能提高小鼠碳粒廓清能力，促进血清溶血素生成。溶血素是一种能增强机体体液免疫功能的抗体，软坚护肝片能发挥护肝作用可能与调节体液免疫功能相关[20]。郭庆渠等[21]报道，软坚护肝片能预防和治疗采用四氯化碳联合酒精建立的肝纤维化模型大鼠的肝纤维化，减少大鼠血清透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(ⅣC)含量。莫凤珍等[22]报道，软坚护肝片可通过降低胶原的合成及抗自由基而发挥抗肝纤维化的作用。

动物实验研究表明，软坚护肝片对心血管系统、呼吸系统、血液系统、自主神经系统无明显影响；长期毒性研究结果显示，软坚护肝片对动物日常生命活动，器官组织病理生理无明显影响，提示用其治疗疾病毒性小、安全性高，具有较高的潜在临床应用价值，值得进一步深入研究[23-24]。

2 软坚护肝片的临床应用

软坚护肝片有护肝、抗乙肝病毒、预防和治疗肝癌的作用。梁水庭等[14]报道，应用软坚护肝片治疗32例HBsAg、HBeAg均为阳性的肝炎患者(4片/次，4次/d，连服2个月为1个疗程，中间停药3～4个月后继续第2个疗程，治疗2年)，2年后患者的HBsAg 转阴率为28%，HBeAg转阴率为78%；维持治疗5年后疗效稳定，6例患者HBeAg转阴后复阳。该课题组运用相同的方法治疗另外42例HBsAg、HbeAg均阳性的肝炎患者，2年后的HBsAg转阴率为57%，HBeAg转阴率为81%。慢性乙型肝炎患者发展至终末期时，患者通常表现为肝硬化、肝癌，软坚护肝片具有一定的抗病毒作用，提示其对肝硬化、肝癌患者也有一定的治疗作用。梁水庭等[25]报道，他们应用软坚护肝片对34例慢乙肝伴肝硬化患者进行治疗，结果显示该药抗乙肝肝硬化的有效率达到81.5%，治疗后患者甲胎蛋白(AFP)转为阴性，谷丙转氨酶(GPT)、麝香草酚浊度试验(TTT)恢复正常。程树群等[26]报道，对乙肝肝癌术后患者进行抗病毒治疗，可以延长患者术后的总生存期、降低肝癌的复发率。梁水庭等[27]报道，在一项研究中，他们将应用软坚护肝片联合甘草甜素片干预的肝癌高危人群设为实验组，将不服药或单纯使用护肝药干预的肝癌高危人群设为对照组，实验组对象服用软坚护肝片及甘草甜素片，3个月为1个疗程，每年服用2个疗程；对照组对象不服药或服用其他护肝药。在随后3年的随访研究中，实验组对象(139例)的肝癌发生率为0.72%，对照组对象(252例)的肝癌发生率为9.9%。软坚护肝片对肝癌术后患者的肝癌复发具有一定的预防作用，能抑制肝癌复发，延长肝癌患者术后生存时间。梁水庭等[28-29]报道，实验组77例肝癌术后患者服用软坚护肝片及甘草甜素片干预；对照组112例肝癌术后患者服用葫芦素片及肌苷干预，3个月为1个疗程，每年服用3个疗程。结果实验组患者3年、5年的肝癌复发率分别为11.69%和15.58%，对照组患者3年、5年的肝癌复发率分别为30.36%和39.29%；使用软坚护肝片治疗的小肝癌根治术后患者的3年、5年生存率分别为80.0%和68.8%，而使用其他药物的小肝癌根治术后患者的3年、5年生存率分别为56.0%和37.7%。为评估软坚护肝片治疗肝癌患者术后的长期疗效，孙振等[6，30]纳入399例小肝癌根治术后患者为研究对象，将患者分为软坚护肝片治疗组(TCMO)、介入治疗组(ITO)、软坚护肝片联合介入治疗组(TCM-IT)和单独手术治疗组(SO)进行了为期22年的随访研究。单因素和COX多因素分析结果均显示，治疗方式是影响患者总生存时间的独立风险因素；TCMO组患者的中位无病生存时间(152.9个月)明显长于ITO组患者(43.87个月)和SO组患者(20.77个月)，TCMO组与ITO组患者的1年、2年、3年、5年逐年复发率分别为15%和19%、5%和10%、4%和12%，5%和4%；TCMO组与ITO组患者的l年、2年、3年、5年、10年、15年总生存率分别为94.76%和91.85%、91.69%和74.42%、89.27%和55.74%、83.94%和45.50%、71.22%和33.34%、55.58%和9.26%；TCMO组患者无病生存率高于ITO组，总生存率、无病生存率高于SO组；TCM-IT组患者1年、2年总生存率高于TCMO组，但TCMO组患者3～15年的总生存率高于TCM-IT组。

3 展 望

动物实验和临床应用研究结果均显示，软坚护肝片具有很好预防和治疗肝病的作用，特别是预防和治疗肝损伤、肝纤维化、肝癌，治疗过程中对机体无明显副作用，具有很好的潜在临床应用价值。但目前关于软坚护肝片治疗肝病的临床研究仅仅是单中心、小样本回顾性研究，而且在动物实验研究和临床研究中，软坚护肝片发挥治疗作用的具体机制并未阐明。因此，软坚护肝片治疗肝病的疗效及作用机制仍需要进行多中心、大样本前瞻性临床研究去验证。