多管发酵法（2018）测定水中粪大肠菌群方法验证

林晓红 李雁 王晓彤

摘 要： 《水质 粪大肠菌群的测定 多管发酵法》（HJ/T 347.2-2018）该方法对《水质 粪大肠菌群的测定 多管发酵法和滤膜法（试行）》（HJ/T 347-2007）中多管發酵法部分的修订。此次验证实验通过进行空白对照、阴性阳性对照实验、精密度和准确度等项目，结果均合格，故本实验室条件满足新方法要求。

关键词： 粪大肠菌群;多管发酵法;方法验证

【中图分类号】X832     【文献标识码】A     【DOI】10.12215/j.issn.1674-3733.2020.38.241

1 引言

粪大肠菌群又叫耐热大肠菌群，是总大肠菌群的一部分，主要来源于粪便。水质中粪大肠菌群超标主要引起腹泻，肠胃感染等，对人体健康具有潜在的危险性。水中粪大肠菌群的检验是研究水体污染和环境卫生的的重要指标，具有广泛的卫生学意义[1]。

《水质 粪大肠菌群的测定 多管发酵法》（HJ/T 347.2-2018）对《水质 粪大肠菌群的测定 多管发酵法和滤膜法（试行）》（HJ/T 347-2007）中多管发酵法部分进行了修订和完善[2]，主要包括：完善了方法原理的表述;增加了12管法和15管法的检出限;分析步骤中增加了12管法，完善了样品稀释方法;增加了规范性引用文件、术语和定义、样品采集、样品保存、仪器和设备、干扰和消除、精密度和准确度、质量保证和质量控制、废物处理等章节。

本文通过方法验证，验证现有的实验条件和仪器设备是否满足新方法要求。

2 实验部分

2.1 仪器设备及试剂材料

采样瓶、接种环、试管、乳糖蛋白胨培养基、EC培养基、无菌水;高压蒸汽灭菌器（LD2X-50KBS型）、生化培养箱（WH-21C型）、ph计。

2.2 验证内容

2.2.1 空白对照

用无菌水进行实验室空白测定，重复6次实验，结果见表1：

2.2.2 阳性及阴性对照实验

采用爱德士公司大肠菌群有证标准物质（粪大肠菌群可接受范围为78-1541MPN/100ml）作为阳性菌株，用爱德士公司绿脓杆菌有证标准物质（绿脓杆菌可接受范围为36-312MPN/100ml）作为阴性菌株，进行实验。实验结果阳性菌株呈现阳性反应，阴性菌株呈现阴性反应，实验结果合格。

2.2.3 精密度验证

本次验证实验共选取低浓度（取自地下水）、中浓度（取自李村河河流）、高浓度（取自污水处理厂入口）三个不同浓度的样品进行6次重复性实验，结果见表2、表3、表4：

2.2.4 准确度验证

实验室对爱德士公司大肠菌群有证标准物质031418（粪大肠菌群真值为429±71MPN/100ml，可接受范围为72-2720MPN/100ml）进行六次重复性实验，结果由表5所示：

3 验证结果及结论

本次验证项目空白对照、阴性阳性对照、精密度及准确度检测的结果均符合HJ347.2-2018《水质 粪大肠菌群的测定 多管发酵法》方法的要求，所以本实验室可以用该标准方法进行日常的监测工作。

参考文献

[1] 李恒，张志君，王光惠，陈泓霖.多管发酵法与纸片法测定水中总大肠和粪大肠[J].湖南：仪器仪表与分析监测，2020，3：33-35.

[2] 水质 粪大肠菌群的测定 多管发酵法（HJ 347.2-2018）.北京;国家标准出版社，2018.