硼替佐米通过PPARγ途径抑制肺动脉平滑肌细胞TRPC蛋白的表达

田国英 徐磊

肺动脉高压(Pulmonary hypertension，PH)是一类严重危害人类健康的疾病，可导致肺血管阻力和肺动脉压力的进行性升高，从而发展为右心室肥厚，心力衰竭甚至死亡[1]。在过去几十年间，虽然前列环素、内皮素受体拮抗剂、磷酸二酯酶抑制剂等靶向药物的发现[2-3]推动了PH患者的临床治疗，但这些药物疗效有限，价格昂贵，而且只能延迟病程进展或缓解症状，无法有效延长患者的长期生存时间、降低疾病的死亡率[3]。此外儿童患者也给家庭带来打击和负担[4]。因此研发新型的有效、适用、经济的肺动脉高压治疗药物具有十分重要的意义。近年来，有研究表明蛋白酶体抑制剂硼替佐米(Bortezomib，BTZ)对肺动脉高压模型动物有较好的治疗作用，但是其机制并不十分清楚。前期研究发现硼替佐米影响钙池操纵性钙内流(store-operated Ca2+entry, SOCE)是其治疗肺动脉高压的可能分子机制[5]。本研究将研究硼替佐米对肺动脉平滑肌细胞钙池操纵性钙通道(store-operated Ca2+channel，SOCC)组成蛋白TRPC1、6表达的影响并探讨其分子机制。

资料与方法

一、主要试剂和仪器

倒置相差显微镜，为德国Leica公司产品。体式显微镜来自重庆奥特光学仪器有限责任公司。二氧化碳培养箱、三气培养箱购自美国Thermo公司。硼替佐米、T0070907购自美国MCE公司。Cy3标记二抗购自美国Jackson公司。TRPC1、TRPC6、PPARγ兔源性多克隆抗体购自美国Santa Cruz公司，β-actin小鼠源性单克隆抗体购自美国sigma公司。HRP标记的羊抗兔及羊抗鼠二抗，均购于博士德公司。Ⅰ型胶原酶、木瓜酶、DTT购自美国Sigma公司。DMEM低糖培养基、胎牛血清购自美国GIBCO公司。……