一起肉鸡滑液囊支原体病的诊断

陈云霞， 张焕容， 李 凡

(西南民族大学生命科学与技术学院， 四川成都610041)

2018年11月27日，四川彭山某存栏量为2 000 羽的三黄品种肉鸡场，70日龄左右部分鸡的腿关节陆续出现异常，主要表现为跗关节、爪垫、龙骨滑液囊肿胀、皮下组织增厚，有的鸡跗关节周围长出大小不一的水泡，导致鸡不能正常站立和行走，至90日龄，发病率达12%，但死亡率较低。主诉：该鸡场未免疫滑液囊支原体疫苗。曾怀疑是由大肠杆菌、沙门菌、葡萄球菌等细菌，以及鸡病毒性关节炎病毒引起的关节炎，用抗菌素治疗发病鸡，虽有轻微好转，但陆续有新的病例出现。

2 临床症状

病鸡主要表现为明显的跛行，跗关节和爪垫肿胀，触之有热感和波动感，部分鸡胸部出现囊肿；整体采食下降，喜卧，消瘦，羽毛松乱，死亡率低，个别鸡因病程较长，极度衰弱，不能站立。

3 剖检变化

切开跗关节、爪垫及胸部龙骨肿胀处，有黏稠淡黄色渗出液，个别可见黄色干酪样物质；肝脾轻微肿大；心肺正常；肠内无内容物；肾脏无肉眼可见异常。

4 实验室诊断

4.1 染色镜检 取关节内淡黄色渗出液涂片，结晶紫染色镜检，油镜下未发现细菌。将关节渗出液接种到TSA培养基上，经过37 ℃培养24 h，无菌落生长。

4.2 病料采集与处理 取典型症状病鸡腿关节滑液囊新鲜内容物，加入适量生理盐水研磨，吸取上清200 μL提取DNA。

4.3 核酸提取及PCR检测结果 用酚-氯仿法提取4.1中上清液中DNA作为模板，PCR扩增检测滑液囊支原体vlhA基因片段。引物序列[1]如下：上游5′-TTAGCAGCTAGTGCAGTGGCC-3′，下游 5′-GTAACCGATCCGCTTAATGC-3′；预期目的片段大小为300 bp，引物由生工生物工程(上海)股份有限公司合成。……