IgG1型RhcE联合抗体引起新生儿溶血1例报道及家系调查

丁佳栋 张晓萍 王媛 杨楠 张丽娟 王艺媛张晓晶 黄晓燕 赵小丽

1.甘肃省人民医院，甘肃 兰州730000；2.兰州大学生命科学学院，甘肃 兰州730000

Rh血型系统是所有血型系统中已知的、最复杂的血型系统［1］，最初发现的Rh血型只有D抗原，后来发现有55种抗原。现在已知的不规则抗体除抗D抗原外，最多的是抗Rh其他抗原的抗体，如抗E、抗C抗原等，而大多数抗体为IgG型抗体，均能通过胎盘进入婴儿体内引起新生儿溶血。

1 材料与方法

1.1 试剂与材料 抗-A、抗B、ABO细胞、抗体筛选细胞均由上海血液生物技术有限公司生产，抗-D（IgM）由Biotest生产，Rh分型卡由江苏力博医药生物技术股份有限公司生产，抗体鉴定细胞红细胞（16细胞系）由江苏中济万泰生物医药有限公司生产。抗人球蛋白检测卡（中山生科公司，批号：20200319），低离子介质溶液、重悬液、凝聚胺（珠海贝索生物技术有效公司，批号：119063），抗体筛选细胞（上海血液，批号：20200730），抗体筛选谱细胞（中济万泰，批号：20200804）。

1.2 对象 本研究为2019年收活的1例新生儿溶血病样本，患儿母亲21岁，孕1产1，否认其他怀孕史和流产史。血型为B型Rh（D）阳性，患儿为B型Rh（D）阳性，出生后1天产生严重的黄疸，总胆红素为282μmol/L，怀疑新生儿溶血。经检测患儿母亲产生了IgG1型的cE联合抗体，从而引起新生儿溶血。

1.3 方法

1.3.1 抗体筛选。用聚凝胺和抗人球法对患儿母亲和患儿进行抗体筛选，怀疑为抗c、E、M抗体，进行Rh血型检测。

1.3.2 Rh血型检测。对患儿及其父母进行Rh抗原C、c、D、E、e检测。

1.3.3 抗体鉴定。用聚凝胺和抗人球法对患儿及其母亲进行抗体鉴定，用16细胞体系的谱细胞进行抗体鉴定，经过分析图谱鉴定抗体性质。

1.3.4 吸收放散实验。根据Rh分型结果，选取Rh分型分别为CCDEE、ccDee的献血员血液，洗涤3次后离心取1mL，加1mL患者血清，充分混匀，37℃孵育30min，离心取上清，用相应的谱细胞检测抗体；另外，将吸收后的细胞用56℃进行放散，然后用谱细胞进行抗体鉴定。

1.3.5 交叉配血。盐水法、抗人球蛋白法、微柱凝胶法［1］。

1.3.6 新生儿换血。选取主侧配血相合的Rh分型为CCDee的红细胞制备成洗涤红细胞，另外，选取抗体筛选阴性的AB型血浆。洗涤红细胞与血浆的比例为2：1。

1.3.7 IgG分型。分别将患者母亲的血清、患儿的血清以及患儿红细胞放散液加入IgG分型卡中，再加入O型ccDEE红细胞，37℃孵育15min，离心分析结果。

2 结果

2.1 不规则抗体筛选 患儿母亲：Ⅰ：4+，Ⅱ：0，Ⅲ：4+；患儿：Ⅰ：2+，Ⅱ：0，Ⅲ：2+；

患儿父亲：Ⅰ：0，Ⅱ：0，Ⅲ：0；根据抗体筛选图谱，可能的抗体为：抗-c、抗-E、抗-M抗体。

2.2 患者Rh分型结果 患儿的Rh分型为CcDEe，患儿母亲Rh分型为CCDee，患儿母亲Rh分型为CcDEe。

2.3 抗体鉴定结果 患者血清与含16细胞分别用盐水、凝聚胺法、抗人球蛋白法反应，结果盐水法为阴性，则可确定为IgG抗体，同时排除M抗体，确定患者有抗-c、抗-E混合抗体或者联合抗体，加做吸收放散实验。吸收放散结果显示，用ccDee和CCDEE的O型红细胞分别充分吸收后，吸收后的血清抗体鉴定为阴性，而放散结果为-cE联合抗体。另外，患儿红细胞直抗4+，放散结果也为-cE联合抗体，由此可知，抗体性质为IgG型抗-cE联合抗体。

2.4 家系调查 抽取患儿父母亲的血液进行Rh分型，结果患儿父亲为CcDEe，患儿母亲为CCDee。所以，患儿在母亲体内时，母亲产生了抗体导致新生儿溶血。由此推断，这对夫妻下一胎产生新生儿溶血的几率为50%。

根据对患者母亲的调查得知，患儿为第一胎，无怀孕史和流产史。

2.5 新生儿换血 新生儿换血后，血清中胆红素明显降低，血红蛋白逐步提升，患儿情况稳定。见图1，图2。患儿第一天晚上进行新生儿换血，血红蛋白稳步上升，第二天早上又输注0.5u洗涤CCDee分型的红细胞，血红蛋白提升到130g/L。

图1 患儿换血前后血红蛋白

图2 不同时间患儿胆红素水平变化

2.6 IgG分型 患儿的IgG分型为IgG1，其母亲的IgG分型结果为：IgG1+IgG3。患儿红细胞放散液的IgG分型为IgG1。

3 讨论

新生儿溶血中以ABO和RhD较为常见，一般情况下，孕妇与其丈夫的ABO不合，主要是母亲是O型，父亲为非O型时会进行抗体效价测定。也有报道称［2］，B型母亲也会产生IgG抗-A，产生ABO新生儿溶血。有文献报道［3-6］，IgG效价与新生儿溶血存在一定的相关性，IgG效价>64组比<64组有更高的新生儿溶血病（HDN）风险，但ABO溶血较轻，一般不进行换血，临床重视不够。

RhD阴性的孕妇临床较为重视，进行抗体效价的测定，会一直追踪到临近分娩。有文献报道表明［7］，306例病例中，Rh血型引起的新生儿溶血比ABO血型引起的新生儿溶血更重、更快。马峰等［8］研究发现，Rh系统引起的新生儿溶血中，抗-D为主要的抗体类型，其次为抗-E。凤婧［9］等研究发现，抗-D效价大于128的孕妇均产生HDN，并且密切关注抗-D效价监测、胎监、MCA-PSV，S/D，并依据检测结果最终确定终止妊娠的最佳时机。经过积极地治疗，新生儿预后良好，未发生胆红素脑病及其他不良后果。但是，对于其余系统的新生儿溶血却缺乏认识，尤其是Rh其他抗原引起的新生儿溶血。造成这个事实的原因包括Rh系统只有D为强制检测的项目，对于RhC、c、E、e不进行常规检测，且因为Rh系统产生的新生儿溶血一般在二胎中才会出现。另外，个体对于C、c、E、e抗原的反应不相同，导致产生抗体的几率低，也是重视不够的原因。

本例是因为父母RhcE抗原不合引起的新生儿溶血，且经过家系调查印证了其父亲的Rh分型为CcDEe，母亲为CCDee，妊娠产生了抗cE联合抗体，且为一胎。由于RhCE基因位于同一条染色体上，其母亲的基因型为CCDee纯合子，新生儿为CcDEe，说明其cE基因来自父亲。所以，父亲产生的精子Rh基因型为两种：CCDee，ccDEE，概率分别为50%，其下一个孩子的基因型为：CCDee，CcDEe，发生新生儿溶血的发生概率为50%。通过家系调查对下一胎生病的概率进行推算，可以指导患儿家庭来选择是否生二胎。另外，除了ABO、Rh系统产生HDN外，还有MN血型系统也会产生HDN［10］。

本例的一个新的尝试是将IgG的4种分型中的IgG1、IgG3进行测定，根据测定结果与疾病的严重程度进行分析，以期对于以后类似的病例进行预测与分析。有文献报道［11］，IgG3和IgG1同时存在引起的新生儿溶血病更加严重。本例中新生儿只有IgG1，而无IgG3，所以症状较轻，易于救治。对于高效价的IgG抗体应当进行IgG亚类的分型，可以预测新生儿溶血病的发生情况及其严重程度。