ACACB基因DNA甲基化/过表达的肝癌细胞株MHCC97H增殖侵袭迁移能力变化观察

伍柳玉，胡艳玲，刘顺，秦小玲，梁秋丽，刘美良，杨钰，曾小云

1广西医科大学公共卫生学院，南宁530199；2广西医科大学生命科学研究院；3广西中医药大学公共与管理学院

研究［1-2］显示，乙酰辅酶A羧化酶（ACACB）作为参与体内氧化应激、脂质代谢等过程的关键基因，被发现在癌症中也发挥重要作用。已有研究［3-4］显示，ACACB基因在肝细胞癌（HCC）组织中存在表达下调现象，可能与肝癌的发生发展有关。DNA甲基化作为表观遗传的一种，被认为是肿瘤发生的重要危险因素。研究［5-6］表明，在各肿瘤细胞中普遍存在DNA的异常甲基化，其存在导致相关基因表达的沉默或上调，造成包括DNA修复、细胞周期调节、促进细胞凋亡或控制关键的肿瘤相关信号网络通路的改变，影响肿瘤的诊断、发展、分型以及治疗敏感性［7-8］。本课题组前期通过TCGA数据库对ACACB基因进行生物信息学整合时发现，ACACB在肝癌组织中表达下调，且与其甲基化位点cg06131338的甲基化水平呈负相关，据此推测ACACB基因可能具有影响肝癌发生发展的作用，但进一步的研究论证尚未在肝癌细胞株中开展。2018年10月—2020年1月，本研究观察了抑制ACACB基因DNA甲基化/感染ACACB基因过表达慢病毒dCAS9-VP64的肝癌细胞株MHCC97H增殖侵袭迁移能力变化情况，现将结果报告如下。

1 材料与方法

1.1 细胞株、试剂 肝癌细胞株SMMC7721、Hep3B、MHCC97H、MHCC97L及正常肝细胞株LO2均购买于上海中国科学院细胞库，使用含有10%胎牛血清的培养基，于37℃、5%CO2饱和湿度的细胞培养箱中进行细胞培养，待细胞密度达80%～90%时进行传代及细胞提取。胎牛血清……