SPR传感检测抗体结合蛋白与IgG相互作用的研究

蔡志文，肖小平，王雪亮，邵永红，周 洁

1)深圳大学物理与光电工程学院，光电器件与系统教育部/广东省重点实验室，广东深圳 518060； 2)湖南省计量检测研究院，湖南长沙 410014

免疫传感器是一种利用抗体和抗原之间亲和作用，实现目标分析物特异性检测的装置．在免疫传感器的制备中，由于抗体作为识别元件提供了抗体和抗原相互作用的特异性位点，抗体的固定效果对抗原检测至关重要．共价法是最常见的固定方法，但其通常比较耗时，且会导致抗体的随机固定[1]．彼此接近的抗体会引起空间位阻效应，进而影响抗体对抗原的结合能力．利用抗体结合蛋白对抗体的特异性吸附可实现抗体的定点固定．葡萄球菌蛋白A(简称蛋白A)和链球菌蛋白G(简称蛋白G)可以特异性地与抗体的可结晶(fragment, Fc)段结合[2]．然而，目前鲜有评估和比较两者与抗体结合效率的文章．

研究分子间相互作用的一般方法包括放射免疫分析法和酶联免疫分析法[3]等，但这些方法通常需要标记，具有数据分析复杂、不能实时监测反应过程的缺点．动力学分析法可实时监测分子间的结合和解离过程，表面等离子共振(surface plasmon resonance, SPR)传感技术无需对分析物进行标记，可实现高通量的生物分子间相互作用研究．自1990年Biacore公司开发出首台商品化的SPR检测仪器，SPR传感已成为研究分子间相互作用的重要工具[4-5]．SPR传感检测分为强度型、相位型、角度型及波长型方法．强度型SPR传感器的检测装置结构简单，但是动态范围一般只能达到 ～10-5RIU[6]，灵敏度低；……