鸡LTBP1蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

滕 蔓，迟佳琦，柴书军，罗 俊,4

(1.河南省农业科学院 农业部动物免疫学重点实验室/河南省动物免疫学重点实验室，河南 郑州 450002；2.河南省农业科学院 中英禽病国际研究中心，河南 郑州 450002；3.北京中医药大学 东方医院，北京 100078；4.河南科技大学 动物科技学院/动物疫病与公共卫生重点实验室，河南 洛阳 471003)

转化生长因子结合蛋白(Transforming growth factor binding proteins,TGFs)是一类细胞外基质蛋白超家族，具有调节细胞的增殖、分化、发育和凋亡,控制细胞生长速度,刺激细胞外基质形成，抑制免疫反应，增加黏附分子表达，影响胚胎发育和器官形成以及肿瘤发生等生物学功能[1-4]。潜在转化生长因子结合蛋白(Latent transforming growth factor-β binding proteins，LTBPs)是细胞外基质(Extracellular matrix，ECM)糖蛋白超家族的成员，包括纤维蛋白1、2和3以及潜在的TGF结合蛋白1—4[5-7]。与纤维蛋白一样，LTBPs主要由6个半胱氨酸重复序列组成。其中，LTBPs 的1、3、4中的第3个半胱氨酸重复序列是潜在TGFs的共价结合位点[8-9]，在TGFs的储存、激活和调节中起重要作用[10]。

TGF-β信号通路及其相关蛋白是近年来信号传导研究领域的热点，LTBP1蛋白在调控TGF-β信号通路的信号传递中发挥重要作用。LTBP1蛋白的降解可激活TGF-β信号通路，继而导致肿瘤的发生和发展[11-13]。因此，开展相关研究常常需要用到LTBP1蛋白抗体。目前，可用的商品化LTBP1抗体均只能识别哺乳动物细胞蛋白，尚无可用于识别禽源LTBP1蛋白的抗体，严重制约了深入开展相关研究。鉴于此，制备抗鸡LTBP1蛋白的特异性单克隆抗体，旨在为后续禽类LTBP1蛋白相关的功能研究奠定基础。

1 材料和方法

1.1 主要试剂和材料

pET-30a载体为本实验室保存；……