橄榄苦苷对脑缺血再灌注损伤大鼠神经元凋亡及JNK/p38 MAPK信号通路的影响

徐祖清 王诗洋 王枭 刘悦 金华

(1深圳市龙华区中心医院，广东 深圳 518000；2延边大学附属医院)

橄榄苦苷(oleuropein)为环烯醚类葡萄糖苷，广泛存在于木犀科植物中，在油橄榄叶中含量尤为丰富，具有器官保护、降血脂、降血压、降血糖、解毒、抗氧化、抗炎及抗肿瘤等多种药理作用〔1～3〕。近年来，橄榄苦苷对脑缺血再灌注损伤的保护作用逐渐引起了人们的关注。橄榄苦苷对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有保护作用，该作用与抑制炎性反应有关〔4〕。此外，橄榄苦苷对小鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用与减少自由基损伤及抗氧化作用有关〔5〕。本实验在进一步验证橄榄苦苷在保护大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤作用的基础上，着重研究该作用与神经元凋亡及c-Jun氨基末端激酶(JNK)/促分裂素原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号通路的关系，初步阐明作用机制，从而为其临床应用奠定基础。

1 材料与方法

1.1动物 清洁级Sprague Dawley(SD)大鼠70只，雄性，体重200～220 g，购自上海西普尔必凯公司。

1.2试剂 橄榄苦苷购于上海沪震公司，纯度>95%；尼莫地平片为德国拜耳公司产品，规格为30 mg/片；2，5，5-氯化三苯基四氮唑(TTC)由美国Sigma公司提供；实时定量聚合酶链反应(qPCR)测定试剂盒，大连宝生物公司。JNK、磷酸化(p)-JNK、p38及p-p38多克隆抗体，美国 Santa Cruz公司。

1.3仪器 MS-TS型分析天平，梅特勒-托利多(上海)公司；600-BS-Ⅱ型电热恒温干燥箱，上海跃进医疗器械厂；QuantstudioTMDX型定量PCR仪，美国ABI公司；Mini-3型垂直式蛋白电泳仪，美国 Bio-Rad公司。

1.4方法

1.4.1分组、给药及脑缺血再灌注损伤大鼠模型建立 SD大鼠按体重随机分为5组，即假手术组、模型组、尼莫地平组(0.5 mg/kg)及橄榄苦苷高、低剂量组(40、20 mg/kg)，每组14只。连……