牛坏死杆菌43K OMP 单克隆抗体的制备及鉴定

贺显晶，张思瑶，蒋剑成，王丽娜，肖佳薇，汪锋锋，孙东波，郭东华

黑龙江八一农垦大学动物科技学院，黑龙江大庆163319

坏死杆菌（Fusobacterium necrophorum）是革兰阴性、无鞭毛和芽胞的严格厌氧性细菌，广泛存在于人和动物的呼吸道、消化道和泌尿道黏膜，作为一种机会主义病原，能引起人和动物多种坏死性化脓性疾病。坏死杆菌可引起牛肝脓肿、腐蹄病和坏死性喉炎，目前已成为临床子宫内膜炎和乳房炎的特征菌属，给畜牧业带来了严重的经济损失。

牛坏死杆菌侵入动物机体后，主要通过毒力因子完成其对动物的感染以及介导机体损伤，其中主要的致病因子包括：白细胞毒素、溶血素、内毒素脂多糖、血凝素、黏附素、血小板凝集因子、皮肤坏死毒素和一些胞外酶［1］。近10 年来，有关坏死杆菌致病机理的研究多集中在白细胞毒素、溶血素、内毒素等毒力因子［2-7］。外膜蛋白（outer membrane protein，OMP）作为一种革兰阴性杆菌细胞壁特有的蛋白质，在维持细菌细胞膜完整性、诱导细菌产生耐药性、调节细菌生物被膜形成、促进细菌黏附和侵袭能力、物质运输及介导机体免疫反应等方面，发挥重要作用［8］。因此，深入了解OMP 功能为探究革兰阴性致病菌致病机制奠定了基础。2013 年，本实验室首次鉴定了牛坏死杆菌43K OMP，并在后续试验中发现其能激发出特异性的体液免疫和细胞免疫，其将有望成为坏死杆菌病亚单位疫苗的候选抗原。本文经原核表达系统表达并纯化牛坏死杆菌43K OMP，制备单克隆抗体，为深入研究牛坏死杆菌致病机制及其有效防治措施奠定基础。……