张春 林建源 吕桂芳 吴方芳 林枫 郭英
重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)是临床工作中常见的危重症疾病,总病死率达30%[1];随着我国人民生活水平的提高,酒精性胰腺炎、高脂血症性胰腺炎发病率不断升高,重症急性胰腺炎进展快,患者腹腔内环境改变,肠黏膜屏障遭到不同程度破坏,可导致其肠黏膜屏障通透性增高,肠道内细菌容易易位,继发腹腔感染和全身炎症反应。地塞米松是人工合成的长效糖皮质激素,其具有抗炎、减少毛细血管通透性、抑制过氧化反应等作用;对机体内免疫应答及炎症反应起到重要的调节作用,但其对重症急性胰腺炎肠黏膜屏障功能的影响还有待深入研究。本研究通过建立大鼠SAP模型,通过检测SAP大鼠肠黏膜NF-κB蛋白表达及肠黏膜通透性实验等,探讨地塞米松注射液在SAP大鼠肠黏膜屏障保护中的作用机制。
1.1.1 实验动物与试剂 清洁级SD雄性大鼠 30只,鼠龄 8周,体重180~220 g,购于吴氏实验动物中心[合格证号:SCXK(闽)2016-0002],饲养环境保持相对温度、湿度、清洁、无特殊病原体,清洁饮用水及饲料供大鼠自由摄入。4%牛磺胆酸钠购置于(索莱宝公司);三氯水合物(麦克林公司);地塞米松注射液(容生制药有限公司)。Anti NF-κB抗体购置于(abcam公司)。荧光素标记葡聚糖(FITClabeled dextran 4000,FD4)均购自美国Sigma公司。
1.1.2 实验分组 将30只大鼠随机分为三组(假手术组、模型组和实验组),每组10只,将三组大鼠全部术前禁食12 h、禁水2 h后,采用腹腔注射10%水合氯醛(0.3 ml/100 g)充分麻醉大鼠,参考赵中江等[2]方法,经胰胆管注入4%牛磺胆酸钠(0.1 ml/100 g,注射速度 0.2 ml/min),建立重症急性胰腺炎大鼠模型[3]。……