非优质胚培养至第7天囊胚冻融移植成功获得活产1例

屈春凤，莫凤明，韦霁芸，班婷

(河池市人民医院生殖医学中心，河池 547000)

一、病例资料

女方，33 岁，2019年3月因继发性不孕11年到我中心就诊。患者自诉2004年足月顺产1女，产后3个月放置宫内节育器避孕；2008年行取环术，术后月经规律，性生活正常，未避孕，但一直未孕。就诊时，体质量指数26.7 kg/m2，基础FSH 7.41 U/L，LH 5.79 U/L，AMH 6.32 ng/ml，B超监测排卵正常。2019年5月行子宫输卵管造影提示双侧输卵管通畅，染色体核型分析为46，XX，无基础疾病，无不良孕史。

男方，38岁，2019年3月行精液检查结果为精液量2.2 ml，精子浓度16.4×106/ml，精子活动率54.1%，前向运动精子率32.5%，正常形态精子率4%。2019年4月再次行精液检查结果为精液量4.8 ml，精子浓度7.8×106/ml，精子活动率47.2%，前向运动精子率31.0%，正常形态精子率4%。两次结果均提示为少弱精子症，无烟酒嗜好，无基础疾病史，染色体核型分析为 46，XY。

夫妇双方曾于2019年7月在我院行第一周期人工授精助孕，精液处理后前向运动精子总数未达标(<10×106/ml)，患者及家属签字要求继续行人工授精手术，但未孕。2019年8月在我院行第2周期人工授精助孕，精液处理后仍不达标，取消人工授精周期。于2019年10月转体外受精-胚胎移植技术助孕，采用短效长方案进行降调节，注射用尿促卵泡素(珠海丽珠制药)进行促排卵，2019年10月16日在阴道超声引导下穿刺获得5枚卵母细胞。取卵当天男方采用手淫法取精，将密度梯度离心法处理后的精子用于体外受精。体外受精4 h后，根据脱颗粒细胞第二极体出现情况进行成熟和受精判断，发现5枚卵母细胞均为成熟卵母细胞(MⅡ)，立即对未受精的成熟卵母细胞行卵胞浆内单精子注射(ICSI)，获得4枚正常受精卵。培养至第3天获得2枚优质胚胎(8Ⅱ级胚胎)和2枚非优质胚胎(1枚5Ⅲ级，1枚4Ⅲ级)，新鲜移植 2 枚(8Ⅱ级)胚胎，剩余1枚5Ⅲ级和1枚4Ⅲ级进行囊胚培养。培养第5天未形成囊胚，第6天形成1枚I期囊胚，延长培养至第7天形成1枚4BC 囊胚，采用商品化玻璃化冷冻试剂及载体(KITAZATO，日本)，予以冷冻保存。

胚胎评分：卵裂期胚胎评级根据卵裂球数目、碎片、卵裂球的均匀程度等情况评估胚胎质量，第3天卵裂期胚胎细胞数为7～9个、碎片比例不超过20%的Ⅰ级和Ⅱ级胚胎为优质胚胎。囊胚评分参照 Gardner 评分系统[1]，第5～6天≥3BB评为优质囊胚，第5～7天≥3BC评为可用囊胚。

冻融胚胎移植患者内膜准备：新鲜移植失败后，患者于2020年1月回我院行冻融囊胚移植。月经周期第2天行B超监测内膜，口服戊酸雌二醇片(拜耳，德国)2.0 mg/次，2次/d，6 d后增至6 mg/d，再6 d后增至8 mg/d；第17天开始肌注黄体酮(天津金耀药业)60 mg/次，1次/d进行内膜转化，内膜转化第7天进行解冻囊胚移植。

复苏移植：采用商品化玻璃化解冻试剂(KITAZATO，日本)进行胚胎复苏。……