转录调控因子GntR10在布鲁氏菌感染细胞和小鼠模型中的毒力作用研究

李志强,王书利,席丽,崔艳艳,张春梅,施传信,张辉

(1.商丘师范学院 生物与食品学院,河南 商丘 476000；2.石河子大学 动物科技学院,新疆 石河子 832000)

布鲁氏菌(Brucella)是革兰氏阴性胞内寄生菌,可以在人和动物的专业和非专业吞噬细胞内生存,引起人和多种动物发生疾病[1].在布鲁氏菌的菌属中,羊种布鲁氏菌、猪种布鲁氏菌和牛种布鲁氏菌可以感染人,引起人类布鲁氏菌病[2].牛种布鲁氏菌是牛布鲁氏菌病的病原体,分布广泛,可引起牛的流产和人慢性感染性疾病,特别是在发展中国家可造成巨大经济损失.疫苗免疫是有效控制牛感染本病的途径.目前,S19和RB51减毒活疫苗已经被广泛用于牛布鲁氏菌病的预防.然而,如果将这些疫苗用于怀孕动物,可能会引起流产.因此,这些疫苗对于动物而言存在一定毒力,限制了其使用.为了解决这些问题,采用相关毒力基因缺失技术改善现有疫苗.

GntR家族是一类非常重要的毒力调控子,广泛分布在病原菌中,它们调控细菌的许多生物过程.GntR调控子包含从GntR1至GntR20毒力因子.质粒标记诱变技术显示羊种布鲁氏菌16MΔgntR10突变株在小鼠体内是减毒的.因此,GntR10在布鲁氏菌致病过程中扮演重要角色.本研究用2308ΔgntR10突变株感染上皮细胞系(HPT-8)、小鼠巨噬细胞系(RAW 264.7)和小鼠模型(BALB/c),目的是探索牛种布鲁氏菌2308(S2308)在细胞和小鼠模型中的胞内存活作用,揭示GntR10在细胞和小鼠感染过程中调节布鲁氏菌毒力的可能机制.

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 菌株、质粒和引物

布鲁氏菌S2308、枯草芽孢杆菌(B.subtilis)为本研究室保存；……