抗凝血酶III通过SIRT1-NF-kB通路发挥肾保护作用

吴本鹤，薛 飞，张汉妤，朱 云*

（扬州大学附属江苏省苏北人民医院，江苏 扬州 225001）

脓毒症是一种由细菌感染引发的全身扩散性炎症反应，是重症监护室内病患死亡的最主要原因，然而，目前临床上没有特别的治疗脓毒症的办法。

近来研究发现抗凝血酶I I I 具有抗炎作用。多项研究[1-2]显示，AT-III缺乏导致肾损伤加重。NF-kB是一种经典的信号传导通路，其可通过与Sirt1蛋白结合使TNF-α等炎症因子的产生减少[3]。

本课题通过研究AT-III对脓毒症肾脏炎症因子表达的影响，并进一步研究经治疗后STRI1-NF-kB通路蛋白变化，对其肾脏保护的可能机制进行初步研究，以期为脓毒症的治疗提供一种新方法。

1 材料与方法

1.1 动物分组及方法

30只ICR小鼠购自南京市江宁区青龙山动物繁殖场（生产许可证编号：SCXK（京）2017-0001），体重18～22 g。将小鼠随机分为两组，分别为假手术组（Sham组）10只、CLP组20只。AT-III给药量按200ug/kg计。

1.2 模型制备：

参照文献[4]术式，即：麻醉小鼠后，取腹部正中切口3cm，查找并分离盲肠，于盲端处结扎，用穿刺针在结扎处远端贯穿盲肠，再将盲肠回纳，关闭腹腔。假手术组手术方式同前，腹腔注射氯化钠溶液2ml。

1.3 标本采集

分别于造模后0h、6h、12h经髂外静脉采血2ml，将标本静置1h后按4500r/min离心5分钟，取上清液，置于-80℃冰箱保存。处死大鼠，取出右侧肾脏，固定于甲醛溶液中。

2 实验方法

2.1 脓毒症肾损伤标志物检测

按照Ccr、BUN及NGAL ELISA试剂盒 (美国R&D Systems公司)说明进行操作，依标准曲线计算出样品浓度,再乘以稀释倍数得到各样品的实际浓度。

2.2 肾脏组织中炎症因子的表达

固定肾组……