微生物源活菌除草剂活性筛选方法研究

张志刚，王开梅，吴兆圆，万中义，方 伟

（湖北省生物农药工程研究中心∕湖北省农业科技创新中心生物农药分中心，武汉 430064）

除草剂活性评价的方法多种多样，主要差异在于培养基质和培养条件，但基础材料只有种子、离体叶片或实生苗。在除草剂活性评价中，根据活性特点选择不同的评价方式和培养条件［1，2］。基于水琼脂培养基的微孔板高通量筛选方法适用于化合物的筛选，在除草剂筛选中应用最多，但可持续观察时间短，抗杂菌污染能力差，不适用于杂草致病菌的筛选。微生物源活菌剂的成分复杂，活性化合物和杂草致病菌的发现同样重要，筛选方式往往直接决定活性表现。为尽可能地让不同作用机理的成分充分表现出活性、降低假阴性率，仅使用某一种评价方法是不完整的［3，4］。本试验比较了几种除草剂筛选方法的活性反应和可操作性［5］，同时进行了不同类型样品模拟筛选，旨在找到高效、稳定的微生物源活菌除草剂筛选模式。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 种子及实生苗 狗牙根种子发芽率大于70%，保藏温度4 ℃。反枝苋种子发芽率大于95%，保藏温度4 ℃；室内栽培60～80 d 的狗牙根及反枝苋苗；采用直径4 cm 的微型盆栽培12～14 d 的狗牙根及反枝苋实生苗。

1.1.2 琼脂粉、培养基原料 琼脂粉（北京鼎国昌盛生物技术有限责任公司生产，型号为DH010-4），培养土（蛭石与东北黑土混合而成，蛭石∶黑土=3∶1），直径5、15 cm 的花盆，0.5 mm 的喷笔。

1.1.3 试剂及标准样品 乙醇、吐温-80 试剂均为市售分析纯化学试剂，除草剂标准化合物样品乙氧氟草醚、硝磺草酮为市售原药，单端孢霉素由湖北省生物农药工程研究中心化合物分析室提供。……