鸡HDLBP 基因SNP 鉴定及其与蛋用性能关联分析

黄 涛，程 璐，莫长欢，王孝忠，申 杰，皮劲松，龚炎长

（1.湖北省农业科学院畜牧兽医研究所∕湖北省农业科技创新中心∕动物胚胎与分子育种湖北省重点实验室，武汉 430064；2.华中农业大学农业动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室，武汉 430070；3.宜昌市畜牧兽医中心，湖北 宜昌 443000）

高密度脂蛋白结合蛋白（HDLBP），最初被认为是HDL 受体，位于细胞表面［1，2］。研究表明，大部分Vigilin 也存在于细胞质中［3-5］。有报道HDLBP 深入参与了多种生物过程，如固醇代谢［1，6-8］、致癌过程［9，10］、翻译调控［11，12］、异染色质的形成［5，13，14］、tRNA的核输出［15］、RNA 的胞质转运［16］和特定mRNA 的代谢［17-19］。

极低密度脂蛋白（VLDL）和卵黄蛋白原（VTG）从肝脏分泌到血管中，并转移到卵巢以满足卵泡生长和发育的要求［20，21］。研究表明，HDLBP 通过调节载脂蛋白B∕Apob mRNA 的翻译来调控VLDL 分泌［22］，提示HDLBP 可能是调控产蛋的候选基因。鸡的HDLBP 基因定位于9 号染色体，包含29 个外显子，其编码两个转录本，分别命名为HDLBP-201、HDLBP-202（http：∕∕asia.ensembl.org∕index.html）。本研究分析鸡HDLBP基因编码区多态性及与蛋用性能的关联性，探究卵泡颗粒细胞中HDLBP 扮演角色。

1 材料与方法

1.1 性状数据收集

采集的血样来源于欣华鸡。在青年鸡开产后，记录33 周龄产蛋数。此外，第42 周龄时对每只鸡连续收集3 枚蛋，用于蛋品质测定，测定指标包括鸡蛋重量（EW）、蛋黄重（YW）、哈克单位（HU）、蛋黄颜色（YC）。

1.2 SNP 鉴定与分型

对采集的血样用传统酚氯仿方法抽提DNA，然后用于HDLBP（基因ID：395984）的聚合酶链式反应（PCR）扩增和PCR-RFLP 基因分型，引物序列如表1 所示。10 μL PCR 反应体系包括5 μL 2×TaqPCR Master Mix、0.5 μL gDNA 模板（50 ng∕μL）、3.5 μL ddH2O 和上、下游引物（10 pmol∕μL）各0.5 μL。

使用1.5% 琼脂糖凝胶检测PCR 产物，并将其送至武汉擎科创新生物科技有限公司进行测序。……