珍稀植物日本荚蒾遗传多样性的ISSR分析

蒋明，应梦豪，徐丽娜，马佳莹，邬张颖，杨如棉，朱欣，李彦蓉

（台州学院生命科学学院,浙江椒江318000）

荚蒾属（Viburnum）隶属忍冬科（Caprifoliaceae），为灌木或小乔木，落叶或常绿。荚蒾属植物在全世界约有200种，分布于温带和亚热带地区，我国约有73种，其中45种为我国特有种［1］。日本荚蒾（V.japonicum）为常绿植物，叶片革质，呈卵型、近卵型或宽倒卵型，叶片表面呈深绿色，背面浅绿且叶脉突出；花序复聚伞形，花色洁白，果熟时鲜红色，具有较高的观赏价值（见图1）［2］。日本荚蒾大多生长在海岛山坡林下、杂木林或乱石堆中，数量十分稀少。日本荚蒾为中国-日本间断分布种，在韩国、日本等近海地区亦有发现，我国台湾北部海岸也有少量分布，大陆仅见于浙江舟山东福山岛、台州大陈岛、临海头门岛、田岙岛和雀儿岙岛等地［3-4］。近年来，随着浙江东部海岛的旅游开发，部分海岛植物的生境遭到一定程度的破坏，日本荚蒾现已被列入《浙江省重点保护野生植物名录》（第一批），是极小种群拯救保护物种之一［5］。

图1 日本荚蒾Fig.1 Viburnum japonicum

与形态学、细胞学及生理生化标记相比，分子标记十分稳定，不受材料环境和发育阶段的影响，近年来，在遗传多样性、亲缘关系分析、种质资源鉴定、基因定位和遗传图谱构建等研究中得到广泛应用［6］。简单序列重复区间扩增多态性（inter-simple sequence repeat，ISSR）是由 ZIETKIEWICZ 等［6］基于简单序列重复（simple sequence repeats，SSR）建立的一种新型分子标记技术，其在SSR的3’或5’端加上2～4个锚定核苷酸，以提高反应的专一性，PCR产物经电泳分析后可获得遗传多样性信息［7］。ISSR技术具有操作简便、重复性好和多态性高等优点，在遗传多样性研究中应用较广［8］。……