牛蛙血细胞核酸和脊髓运动神经细胞的显色观察*

徐本锦，刘 玲，宣 焱，杜 淼

山西医科大学汾阳学院医学检验系，山西吕梁 032200

核酸的细胞化学染色是利用化学试剂与核酸分子反应生成带颜色的产物，从而达到对细胞内DNA和RNA定位和定性的目的，是细胞遗传学研究的重要手段。1924年有研究者发明了DNA显色的经典方法——福尔根反应[1]。该反应还可用于DNA的化学计量测定[2]、区分肿瘤性质和判断病变程度等[3]。甲基绿-派洛宁染色已被广泛用于细胞内DNA和RNA的显示[4]。

牛蛙具有血细胞大[5-6]、肌肉发达、性情温和等特点，是了解肌肉、呼吸系统、心脏和循环系统[7]结构特征的良好材料。本研究对牛蛙血细胞中的核酸和脊髓运动神经细胞进行了显色，对实验的注意事项进行了分析，现报道如下。

1 材料与方法

1.1一般材料 健康牛蛙数只，染色缸，载玻片，盖玻片，镊子，剪刀，香柏油，擦镜纸。

1.2仪器与试剂 仪器：普通光学显微镜，恒温水浴箱。主要试剂：甲基绿-派洛宁混合液，95%乙醇，1%亮绿染液，1 mol/L HCl，Schiff试剂，1%甲苯胺蓝染液。

1.3方法

1.3.1牛蛙血细胞DNA的福尔根反应显色 具体实验步骤包括：(1)取材。麻醉牛蛙，将其置于一白瓷盘中，腹面朝上，沿着尾部向头部方向依次剪开皮肤和肌肉，找到心脏。剪开心包膜，使心脏完全显露出来，然后在心脏上剪一小口。(2)涂片。取一张干净的载玻片，轻轻蘸取心脏血，以45°夹角在另一张干净的载玻片上轻轻向前推，即可做成血涂片，自然晾干。(3)水解。将血涂片置于室温下的1 mol/L HCl中水解2 min，然后置于60 ℃的1 mol/L HCl中水解8 min，再在室温下的1 mol/L HCl中水解2 min。(4)染色。将血涂片用小流量的水冲洗，除去多余的HCl，然后在血涂片上滴加一层Schiff试剂，染色30 min，再用小流量的水冲洗，然后放入1%的亮绿染液中复染30～60 s，小流量的水冲洗后晾干。……