NT-3修饰的施万细胞联合胶原—壳聚糖神经导管对大鼠坐骨神经损伤的修复作用研究

许 蕙，叶 放，于 宁，王艳生 (沈阳医学院附属中心医院手外科,辽宁 沈阳 110024)

周围神经系统(peripheral nervous system，PNS)损伤通常会导致神经痛或肌肉运动功能受损[1-2]。目前，用于修复PNS损伤的外科手术主要有神经断端吻合术、自体神经移植和人工神经导管移植[3]。尽管自体神经移植是首选治疗方案，但由于供体组织可用性有限，且存在丧失神经功能和形成神经瘤的可能，因而限制了其临床应用[4]。自体施万细胞(Schwann cells，SCs)在周围神经再生中起关键作用[5]。植入人工导管后，增殖的施万细胞可以释放营养因子，引导再生轴突穿过病变，但因其无法快速生成足够的细胞，故而其临床应用受到限制。神经营养素3(neurotrophin 3，NT-3)是重要的自分泌因子，可以支持施万细胞存活和分化，并刺激神经突生长和髓鞘形成，有利于受损神经快速修复[6]，但以人工神经导管为载体、复合以NT-3修饰的施万细胞是否有利于施万细胞的存活及PNS损伤的有效修复目前尚不清楚。因此，本研究将复合NT-3修饰的施万细胞联合胶原—壳聚糖神经导管作为植入体，研究其对坐骨神经损伤的治疗效果，以期为临床应用提供新思路。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物 SPF级SD大鼠80只，8周龄，体质量(200±10)g，均为雄性，购自上海剑钝生物科技有限公司，动物生产许可证号：SCXK(沪)2019-0027。本研究经我院动物伦理委员会批准，实验遵守3R保护原则。

1.1.2 药品与试剂 Ⅰ型胶原蛋白(C3867)和壳聚糖(448869)购自Sigma公司，DMEM/F12培养基(A4192001)、胎牛血清(10100147)、0.25%胰酶(15050057)和青霉素—链霉素(10 000 U/mL，15140148)购自美国Thermo Fisher Scientific公司，TUNEL凋亡检测试剂盒(C1088)购自上海碧云……