熟地黄、枸杞子及其混合提取物对小鼠视网膜光损伤的保护作用△

王雪纯 张伟 郭雅图 巩一博

年龄相关性黄斑变性(AMD)已成为全球第三大常见致盲性眼病，也是发达国家老年人不可逆转失明的最常见原因。熟地黄和枸杞子都是我国使用广泛的中草药，具有明目的功效，且早已有研究证明两者均具有抑制氧化应激和细胞凋亡的特性[1-7]。AMD主要损伤机制为视网膜细胞的氧化应激作用导致细胞凋亡[8]，视网膜光损伤的病理过程与其相似，因此本研究通过建立小鼠光损伤模型模拟AMD视网膜病变[9]，探究熟地黄、枸杞子提取物以及两种药物混合提取物对光损伤造成的AMD模型小鼠视网膜功能和结构的保护作用。

1 材料与方法

1.1 主要试剂与仪器超氧化物歧化酶(SOD)测定试剂盒、过氧化氢酶(CAT)测定试剂盒(南京建成生物工程研究所)，TUNEL法荧光试剂盒(美仑生物技术有限公司)，熟地黄提取物、枸杞子提取物及二者混合提取物(天津科技大学提供)，LED灯(深圳市爱图仕影像器材有限公司)，罗兰电生理仪(德国罗兰公司)，Phoenix Micron IV小动物视网膜成像仪(美国Phoenix Research Labs公司)。

1.2 实验动物与分组本实验采用34只C57BL/6野生型小鼠(斯贝福生物技术有限公司)，8周龄，雄性，体质量约20 g，随机分为对照组(8只)、模型组(8只)、熟地黄组(6只)、枸杞子组(6只)、熟地黄+枸杞子组(6只)；各药物干预组连续灌胃9周，根据《中华人民共和国药典》2015版，熟地黄、枸杞子分别用水提法浓缩烘干后，粉碎成粉末，生理盐水混悬灌胃，药物剂量分别为：熟地黄0.45 g·kg-1·d-1，枸杞子0.46 g·kg-1·d-1，剂量及配伍均对实验动物无害[10-11]。灌胃期间，各组小鼠在昏暗的循环光(5 lux，12 h开/关)下，保持良好通风，温度维持在22 ℃，灌胃第9周开始进行造模[3,12]。……