长链非编码RNA 母系表达基因3调控miR-34a对糖尿病视网膜病变Müller细胞活化及炎症因子分泌的影响△

王坤 朱曼辉 陈莉莉 涂园园 万光明 梁申芝

糖尿病视网膜病变(DR)是糖尿病的常见并发症，也是工作年龄人群致盲的主要原因[1]。虽然DR的确切发病机制尚未完全清楚，但研究表明糖尿病患者视网膜的多种异常均与炎症密切相关，应激性视网膜细胞产生的多种细胞因子失调是导致神经血管损伤的关键因素[2-3]，如血管内皮生长因子(VEGF)、白细胞介素-1β(IL-1β)等。其中，Müller细胞源性VEGF是导致DR视网膜炎症、血管渗漏和病理性血管形成的关键因素[4]。尽管抗VEGF治疗具有显著的疗效，但依然存在许多局限性，如需要眼内反复注射，只对疾病晚期有效，更重要的是仅有约一半的患者对治疗有应答[5]。因此，深入探索DR发生发展的机制对于其预防及治疗具有重要的意义。

长链非编码RNA(LncRNA)是一类转录本长度大于200 nt,缺乏蛋白质编码潜能的非编码RNA。随着对LncRNA研究的深入，其在DR中的作用已受到广泛关注[6]。有研究显示,母系表达基因3(maternally expressed gene 3,MEG3)在DR患者血浆及小鼠视网膜中表达降低，沉默MEG3促进视网膜内皮细胞增殖、迁移及管腔形成[7-8]，MEG3过表达抑制大鼠视网膜中IL-1β的产生[9]。但是，有关MEG3在DR的Müller细胞中的作用及机制的报道尚少，本研究旨在通过构建的DR小鼠体内模型及高糖刺激视网膜Müller细胞株(MIO-M1)的体外模型，探讨MEG3在DR的Müller细胞活化及炎症因子分泌中的作用及其机制。

1 材料与方法

1.1 材料8周龄健康雄性C57BL/6小鼠30只，体质量20～22 g，购自苏州大学实验动物中心；视网膜Müller干细胞MIO-M1(北纳生物，中国)；DMEM培养基、青链霉素、胰蛋白酶、胎牛血清(Gibco，美国)；……