悬浮培养肿瘤细胞的生物钟同步化细胞模型建立及其在择时给药研究中的应用

秦文娟，潘梅萍，苏泽杰，侯茹蓉，陆海杰,3*，乐志操

(1.厦门大学附属中山医院肿瘤放疗科，福建厦门361004；2.福州大学生命科学研究所，福建福州350116；3.福建医科大学附属协和医院放疗科，福建福州35001;4.深圳大学医学部，卡尔森国际肿瘤中心，广东深圳518060)

生物钟，即对生命活动的昼夜节律控制，在多方面影响人体健康[1-2].生物钟节律的破坏与肿瘤的发生密切相关，对肿瘤治疗也有重要影响[1-4].目前有很多研究试图开发调控生物钟的小分子药物，以促进对代谢疾病和肿瘤的治疗[5-8].

中枢生物钟由大脑海马区的视交叉上核控制，在光照的影响下形成周期性的基因表达模式，并通过激素及其他信号分子调控外周组织的生物钟[1,9].中枢生物钟与外周组织的生物钟如何偶联并受到调控是一个重要问题，但具体机制至今仍不清楚.通常认为生物钟节律在基因的转录和蛋白质的稳定性方面受到多重反馈机制的调控，其中最重要的是CLOCK与BMAL1组成的转录活化因子复合体，以及PERIOD(PER)与CRYPTOCHROME(CRY)组成的转录抑制因子复合体，共同调节相关基因的周期性表达[1].此外，神经肽、激素(如褪黑素和甲状腺素)、环磷酸腺苷(cAMP)、钙离子信号、核因子κB(NF-κB)信号等都可以调节生物钟的周期性和相关基因的表达[10-15].

虽然生物钟相关基因在每个细胞中都有表达，但是因其节律是独立调控的，故在体外培养的情况下缺乏整体的同步化机制.为此，有研究开发了单细胞报告基因技术，在单细胞水平进行实时检测……