许正卿 周敏 宋鹏涛 王金志 刘顺林*
肺癌是导致癌症死亡的主要恶性疾病。非小细胞肺癌是肺癌的主要病理类型,腺癌占比最高[1-2]。由于肺癌的发病率和病死率较高,早诊断早治疗,对患者预后起重要作用。作为Copines家族中第一个被发现的成员,CPNE1在骨肉瘤中具有重要的临床意义[3],但目前尚未发现其在肺癌中的作用。本实验采用免疫组化方法检测CPNE1蛋白在肺腺癌组织与肺正常组织中的表达情况,并结合临床资料进行分析,初步探讨CPNE1在肺腺癌发生发展中的作用。
1.1 肺腺癌石蜡组织标本收集 收集于浙江省湖州市中心医院、浙江省安吉县人民医院2006年至2009年外科切除且经病理确诊的人肺腺癌石蜡包埋标本128例,所有患者术前均未进行放、化疗。样本中男67例,女61例,年龄22~80岁,平均年龄61岁。正常肺组织30例,男20例,女10例;年龄46~74岁,平均年龄60岁。所有组织标本均经两位有经验的病理科医生证实。所有标本均按照2009年国际抗癌联盟(AJCC,2009)TNM分期标准进行临床分期,Ⅰ、Ⅱ期69例,Ⅲ、Ⅳ期59例;按分化程度低分化65例,高、中分化63例。
1.2 试剂与方法 实验所用组织蜡块经连续切片成4 μm厚度后进行免疫组化染色,免疫组化试剂盒及兔抗人CPNE1多克隆抗体购自Santa Cruz公司(美国)。采用免疫组化方法检测CPNE1蛋白在肺癌组织中的表达,抗体稀释液代替作为阴性对照。
1.3 免疫组化结果判定 CPNE1蛋白在肺腺癌组织及肺正常组织中免疫组化结果判断标准参考YU等[4]报道方法。CPNE1蛋白阳性表达为在细胞质及细胞膜上呈现棕黄色或棕褐色颗粒。……