对硝基苯乙二胺衍生化-HPLC检测脂肽方法

时冠兰

中国石油化工股份有限公司江苏油田分公司石油工程技术研究院，江苏扬州225001

生物表面活性剂是一类由微生物产生的代谢产物［1］，由一个或多个亲水性和疏水性基团组成［2］，具有卓越的表/界面活性，同时还具有特殊的生物活性。生物表面活性剂的两亲结构使其能够吸附于表/界面上，定向分散于水/油体系中，具有乳化［3］、渗透、润湿［4］、分散、起泡、消泡和破乳等表/界面活性［5］。生物表面活性剂因其来源天然、生物亲和［6］、易生物降解等特点，近年来受到广泛的重视，被认为是最具潜力的表面活性剂之一［7-8］。

脂肽是生物表面活性剂中最受关注的一类，但其有来源复杂、产量低、提取周期长等缺点，这限制了对该生物表面活性剂的进一步研究，因此，建立便捷、快速且高效的定性定量分析方法是筛选产脂肽菌种的关键。目前高效液相色谱（HPLC）、油滴扩散、酸沉淀、表面张力和氨基酸显色光度等方法已用于脂肽的定性和定量分析中，其中HPLC 是最灵敏的方法之一。HPLC 的紫外检测是一种常见的脂肽检测手段，大多脂肽含有酰胺键、酯键等结构，决定了其最大紫外吸收波长位于205 nm 左右，溶剂效应及绝大部分物质在此波长附近都有吸收，这导致直接HPLC法的检测灵敏度及准确率下降［9］。针对以上问题，利用对硝基苯乙二胺衍生化-HPLC 法检测脂肽，以改变Surfactin 的最大吸收波长并提高其紫外响应值，达到检测低含量的脂肽以适用于Surfactin 的微量检测的目的。

1 材料与方法

1.1 仪器设备

LC-100 Plus 型高效液相色谱仪（HPLC），上海伍丰科学仪器有限公司；……