长链非编码RNA XLOC-013014在肾癌组织中的表达及对肾癌细胞恶性生物学行为的影响

潘 良,王宇雄,卞亭长,郦俊生,林文耀

(上海市徐汇区中心医院泌尿外科,上海 200030;*通讯作者,E-mail:phmolon@163.com)

肾癌是最常见的肾原发性恶性肿瘤,进展较快、恶性程度较高、预后较差,严重威胁人类生命和健康[1]。肾癌的具体发病机制尚不清楚,研究肾癌发生发展的分子机制,寻找早期诊断标志物和治疗靶点具有重要临床意义。人类基因组中的大部分转录产物均为非编码RNA,其中长度超过200个核苷酸的长链非编码RNA(long-chain non-coding RNA,lnc-RNA)是非编码RNA的重要组成部分[2]。近年来,研究表明lncRNA可参与多种疾病包括肿瘤的发生、发展,与肿瘤的恶性生物学行为如增殖、迁移、凋亡、分化等相关[3]。lncRNA在肾癌中的作用日益受到关注[4]。XLOC-013014作为lncRNA家族的重要成员,长度为494个核苷酸,属于基因内lncRNA,其在肿瘤特别是肾癌中所起的作用及下游分子通路有待进一步阐明。本研究旨在观察XLOC-013014在肾癌组织和细胞中的表达,并通过转染XLOC-013014质粒至肾癌细胞,探究XLOC-013014对肾癌细胞增殖和迁移的影响及其作用机制。

1 材料和方法

1.1 材料

37例肾癌组织和癌旁组织来源于2016年11月至2018年10月上海市徐汇区中心医院泌尿外科手术切除的标本,保存于液氮中。患者术前均未接受过放化疗,标本均经两位以上病理专家确认,37例肾癌组织均为肾透明细胞癌。本研究经本院伦理委员会批准,患者均签署知情同意书。肾癌细胞株(CaKi-1、786-O、A498、ACHN)和正常肾小管上皮细胞(HK-2)购自武汉典型培养物保藏中心,细胞均采用含10%胎牛血清(FBS)的DMEM培养基培养,培养条件为37 ℃、5%CO2。DMEM培养基和胎牛血清(FBS)购自美国Gibco公司。……