幽门螺杆菌上调miR-7致胃上皮细胞GES-1凋亡

鄢春锦,刘 芬,严晓丹,姜 成

(福建中医药大学中西医结合学院病原生物学教研室,福州 350122;*通讯作者,E-mail:jc123666@sina.com)

microRNA(miRNA)是一类非编码小分子RNA,长约22 bp,具有在转录后水平调控基因表达的功能。研究表明,感染幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,Hp)后胃黏膜的多种miRNA表达水平发生改变,影响了胃上皮细胞增殖、凋亡、炎性反应、癌基因或抑癌基因的表达,参与消化道疾病的发生和发展[1]。miR-7是一类较为保守的miRNA,2001年被发现,位于第9号染色体,有miR-7-1、miR-7-2、miR-7-3三种不同的DNA序列,但其成熟序列相同。据报道miR-7在多种肿瘤中表达下降,如MALT淋巴瘤、胃癌、宫颈癌、结直肠癌、乳腺癌等[2-4],具有抑增殖促凋亡的作用。

人们早先观察到Hp感染可致胃上皮细胞凋亡[5],本课题组前期研究工作同样表明,幽门螺杆菌感染可抑制正常胃上皮细胞GES-1的生长[6],并导致细胞凋亡[7],前期研究也发现细胞细菌比1∶50与1∶100这两种浓度和24 h与48 h这两种感染时间对细胞的增殖凋亡影响显著,适合用于在后续实验中对其凋亡机制做进一步探讨。

在Hp致细胞凋亡过程中,具有抑增殖促凋亡作用的miR-7是否起了作用?如果确实有,那么miR-7是如何起作用的,其靶基因可能是什么?

根据生物学信息软件TargetScan、miRBase和相关文献报道[8],NF-κB成员RELA是miR-7的靶基因,miR-7可通过抑制RELA表达改变NF-κB通路活性,抑制下游分子包括与细胞增殖凋亡有关分子如Bcl-2家族蛋白表达,从而影响细胞的增殖凋亡。

为此我们假设:幽门螺杆菌通过调控miR-7水平改变靶基因RELA的表达,导致感染细胞凋亡。为了验证这一假设,我们进行了以下实验。……