血橙花色苷大孔树脂纯化工艺及抗氧化研究

胥 萍，林小靖，付红伟

(1.浙江大学自贡创新中心，四川自贡 643000；2.浙江大学华南工业研究院，广东广州 510000；3.浙江大学，浙江杭州 310000)

血橙[CitrussinensisL.(Osbeck)]属于芸香科柑橘属甜橙类[1]，果实含有丰富的活性物质，如花色苷、类黄酮、羟基肉桂酸、抗坏血酸等[2-3]。花色苷的含量被认为是血橙果实的重要品质指标，其抗氧化活性对人体健康也具有重要意义[4]。血橙中含有的花色苷对人体健康有益，可以抗癌、预防糖尿病和心脏病(动脉硬化)、抗氧化及抗衰老等[5-6]。大孔树脂是一类具有大孔结构的有机聚合物吸附剂，广泛应用于生物化学上的分离纯化。大孔树脂相比于其他的纯化方式，具有大孔网状结构和大比表面积、吸附速度快、选择性好、可循环使用且再生处理经济环保、方便制剂成型等优势[7-8]。本实验比较了四种大孔树脂对血橙花色苷的吸附分离效果，对其吸附解吸性能进行研究，旨在从中筛选出较为合适的血橙花色苷分离纯化树脂类型。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

血橙果实采摘自四川省资中县血橙基地。大孔树脂D101、HPD-300、NKA-9：沧州宝恩化工公司；大孔树脂AB-8：天津允开公司。柠檬酸、氯化钾和盐酸：广州试剂厂。

紫外可见分光光度计：岛津 UV-1800；摇床：江苏太仓TH2-C-1；pH计：赛多利斯PB-10。

1.2 实验方法

1.2.1 血橙花色苷粗品制备

将新鲜血橙果实去皮后打成匀浆，将其置于离心机4 000 r·min-1离心15 min，取上清液备用，即得血橙花色苷粗品[9]。

1.2.2 pH差示法测定血橙花色苷含量

参考文献[9]，采用pH差示法测定血橙花色苷含量。

准确称取1.00 g的各类型大孔吸附树脂，置于具塞锥形瓶中，加入血橙花色苷粗品20 mL，在25 ℃恒温条件下以120 r·min-1的转速搅拌3 h。……