内皮祖细胞来源外泌体在体外循环致脑损伤中作用研究

雷建军， 雷 佳， 周 南， 陈克研， 王 洋

北部战区总医院1.实验动物科；2.神经外科；3.麻醉科，辽宁 沈阳 110016；4.中国医科大学 实验动物部，辽宁 沈阳 110013

体外循环为机械的侵入性循环辅助措施，其产生的脑血管栓塞、痉挛和脑组织的异常灌注可造成原发性脑损伤；各种核转录因子、细胞因子等激活所造成过度的炎性反应又可造成继发性脑损伤[1]。此外，体外循环还可诱导全身性炎症反应和多器官功能障碍[2]。有研究报道，全身性炎症反应显著影响体外循环相关病死率和发病率[3]。辅助性T细胞17(helper T cell 17，Th17)通过分泌细胞因子白细胞介素(interleukin，IL)-17，引起局部组织的炎症性浸润，诱导组织损伤。调节性T细胞(regulatory T cells，Treg)通过表达叉头框蛋白p3(fork head box p3,Foxp3)发挥维护机体免疫平衡的作用。Th17/Treg在正常状态下具有相互拮抗保持机体平衡的作用，二者比例与功能的失衡与脑梗死和各种炎症性疾病的发生、发展密切相关[4]。有研究报道，内皮祖细胞(endothelial progenitor cell，EPC)可分泌大量包含多种生物学功能物质的外泌体，能促进脑创伤后的血管修复[5]。然而，Th17/Treg细胞免疫应答在体外循环致脑损伤中的作用机制尚未明确。本研究通过建立无血预充非停跳体外循环术后认知功能障碍模型，观察来源于EPC的外泌体对体外循环大鼠脑组织炎症性反应和细胞凋亡的影响，并探讨Th17/Treg细胞免疫应答在其中的调控作用，为应用EPC分泌的外泌体治疗体外循环引发的脑损伤提供参考依据。现报道如下。

1 材料与方法

1.1 主要试剂与仪器 纤维连接蛋白(LONZA，美国)；FITC-MEA-I(Sigma，美国)；DiI-Ac-LDL(Sigma，美国)；……