儿童结核病分子生物学诊断方法研究进展

焦伟伟

2019年，全球估算新发儿童结核病患者约120万例，但实际上报例数不足50%，诊断困难是其主要影响因素[1]。对儿童结核病患者及时有效的诊断有助于早期干预治疗，可明显改善患儿预后。但与成年人相比，儿童咳嗽反射较弱，难以获取合格的痰标本；加之结核病患儿痰标本细菌载量较低，病原学阳性检出率低，极大地制约着临床诊断工作的开展。近年来，随着分子生物学检测技术的飞速发展，新型结核病诊断方法不断涌现，我国新的行业标准《WS 288—2017肺结核诊断》也将分子生物学检测纳入到结核病的确诊标准中，可见其对结核病的诊断具有重要应用价值。笔者现针对这些新型诊断方法在儿童结核病诊断中的应用进行综述。

一、GeneXpert MTB/RIF(简称“GeneXpert”)

GeneXpert是以结核分枝杆菌(Mycobacteriumtuberculosis, MTB)的RNA聚合酶活性位点编码区(81 bprpoB核心序列)为靶标，采用半巢式实时半定量PCR进行病原体检测的方法。由于95%以上的利福平耐药MTB菌株在rpoB核心区发生核苷酸变异，因此，该方法可同时检测MTB对利福平的耐药情况。

随着GeneXpert在儿童人群中应用研究的不断增多，世界卫生组织(World Health Organization, WHO)在2014年公布的数据显示，在儿童肺结核诊断中，GeneXpert检测咳出痰、诱导痰或胃液标本的敏感度相近，均高于40%，特异度也较高，约为93%～100%；且对儿童痰液和胃液的检测敏感度分别高于抗酸染色37%和44%，其中，对抗酸染色阳性患儿的检测敏感度可达95%，对抗酸染色阴性患儿的检测敏感度也达到55%～62%；以MTB培养为金标准，GeneXpert检测痰液和胃液的总敏感度和总特异度约为66%和98%[2]。……