基于表面等离子体共振(SPR)技术实时分析RGD基序与整联蛋白的相互作用

李鹏飞, 龚真莉，杜晓华，蒋 韬*

(1.甘肃农业大学 动物医学院，兰州 730070；2.中国农业科学院 兰州兽医研究所 家畜疫病病原生物学国家重点实验室国家口蹄疫参考实验室，兰州 730046)

口蹄疫(foot-and-mouth disease，FMD)分布于世界各地，是一种具有高度传染性的病毒性疾病[1-2]，因其具有重大的经济影响，被认为是影响畜牧业发展最重要的疫病之一。口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus，FMDV)是引起FMD的病原体，属于小RNA病毒科，口蹄疫病毒属，由O、A、C、SAT1、SAT2、SAT3和Asia1 7种血清型组成[3]。FMD完整的病毒粒子为正二十面体对称结构, 由VP1、VP2、VP3、VP44种结构蛋白各60个拷贝组成, RNA分子被包裹在内[4]。VP1～VP3 3种结构蛋白暴露在病毒颗粒表面且聚集成蛋白质三聚体复合物，较小的结构蛋白VP4隐藏于内部[5]。VP1蛋白是FMDV颗粒表面的主要结构蛋白，在其易变的 G-H 环上不仅含有病毒主要的抗原位点，而且含有一个高度保守的RGD基序(精氨酸-甘氨酸-天门冬氨酸)，该基序是病毒粒子与细胞表面整联蛋白结合引起感染的主要结合位点。尽管RGD依赖的整联蛋白受体通过RGD基序识别配体，但FMDV-VP1蛋白G-H环中VP1侧面的氨基酸残基在FMDV感染中同样起重要作用。如RGD依赖性整联蛋白αvβ5和α5β1并未充当FMDV的受体[6]。VP1 S154D突变导致Asia1 型FMDV使用猪整联蛋白受体αvβ6和αvβ8的能力增加，从而增加了其在宿主细胞中的复制水平，增强了对宿主猪的致病性[7]。

整联蛋白是哺乳动物细胞黏附和信号传导的关键蛋白之一[8]。迄今为止，已鉴定18种不同的α亚基和8种β亚基非共价结合构成24种整联蛋白异二聚体跨膜糖蛋白受体，可与多种细胞或细胞外配体结合，通常整联蛋白不具有活性，在活化后才能成为黏附剂[9]。……