重组G5P蛋白的原核表达纯化及与PrPSc结合能力的鉴定*

朱 峰，谭家亮，吴 江，杨 茹，毕 昊，夏剑波

1华中科技大学同济医学院附属协和医院心血管内科，武汉 430022 2广东三九脑科医院神经外科，广州 510510 3湖北省阳新县妇幼保健院检验科，阳新 435200 4武汉血液中心输血研究所，武汉 430030 5华中科技大学同济医学院附属湖北省妇幼保健院检验科，武汉 430070

朊病毒病(Prion disease)是由朊病毒感染引起的神经退行性疾病。朊病毒是正常的朊蛋白(PrPC)发生构象变化后形成具有部分蛋白酶K(proteinase K，PK)抗性的异常朊蛋白(PrPSc)粒子，主要侵袭人类和动物的中枢神经系统，致死率为100%。在动物中，最常见的朊病毒病包括羊的瘙痒病(scrapie)、牛的海绵状脑病(bovine spongiform encephalopathy，BSE)和鹿的慢性消耗性疾病(chronic wasting disease，CWD)。人类朊病毒病包括克雅氏病(Creutzfeldt-Jakob disease，CJD)、致死性家族性失眠(fatal familial insomnia，FFI)、库鲁病(Kuru disease)和gerstmann-strausler-scheinker综合征(GSS)[1]。人类朊病毒病可以分为散发性、家族性及获得性。食用朊病毒感染的牛肉可获得变异型CJD(variant CJD，vCJD)。vCJD已证实可通过输血在人群间传播[2]。朊病毒病可以跨物种传播，并可在人群间传播，因此对全球公共卫生安全造成很大危害，朊病毒病的诊断对保障公共卫生安全具有重要的意义。

根据“唯蛋白质”假说，朊病毒曾被认为是不含核酸的感染性病原体，有别于细菌、病毒和真菌等。所有形式的朊病毒疾病都有一个共同的致病机制，即宿主编码的正常PrPC转化为致病性PrPSc。PrPSc具有不溶性、致病性和传染性的特点。构象变化后形成的β-折叠结构被认为是赋予PrPSc抗蛋白酶特性的原因，并导致各种构象的PrPSc的形成，它们统称为朊病毒株。迄今为止，许多针对朊蛋白的抗体已被研制以用于诊断，然而，它们大多数缺乏对PrPSc识别的特异性，不能区分PrPC和PrPSc，限制了其应用，因此有待研发能特异性结合PrPSc的分子，以提升PrPSc的检测水平[3]。……