嗜水气单胞菌外膜蛋白AH6169的生物信息学分析及其原核表达

康超，荣娜，简思杰，孙薇，刘祥，陈琛，陈春琳

(陕西理工大学生物科学与工程学院，中德天然产物研究所，陕西 汉中 723001)

嗜水气单胞菌(Aeromonashydrophila，A.hydrophila)属于弧菌科气单胞菌属，是一种机会条件致病菌，可导致鱼类多种疾病症状，包括尾巴和皮肤腐烂以及出血性败血病，也可诱发人类的软组织伤口感染和腹泻，尤其在鱼类养殖中造成的高死亡率，给水产养殖业带来巨大的经济损失[1-2]。抗生素药物是治疗该菌引发病症的主要手段，但长期使用会导致细菌耐药性增加和药物残留等问题[3-4]。外膜蛋白(Outer membrane protein，OMP)是位于细菌表面蛋白的总称，有助于维持细菌结构的完整性并参与细菌的适应性反应[5-7]。研究显示，在与细菌毒力相关的各种因素中，由于外膜蛋白表面暴露和宿主间存在广泛的相互作用，使得宿主易于产生免疫应答，外膜蛋白具有疫苗的潜力，并已被证明赋予针对革兰氏阴性细菌的保护性免疫力[8-9]。高云山等[10]研究发现重组蛋白OmpF具有较好的免疫原性,可用于制备气单胞菌交叉型抗体。毛然然等[11]研究发现嗜水气单胞菌重组外膜蛋白OprM对斑马鱼的相对免疫保护率达89.47%，更适合于作为嗜水气单胞菌亚单位疫苗的候选成分。然而，关于嗜水气单胞菌外膜蛋白AH6169的研究尚未见报道。本研究选取嗜水气单胞菌主要外膜蛋白AH6169为研究对象，分子克隆获得AH6169蛋白的原核表达菌株，探讨其最佳表达条件，纯化获得AH6169蛋白并制备小鼠抗血清；探究AH6169蛋白的抗原性，结合AH6169蛋白生物信息学分析，为嗜水气单胞菌疫苗的研究提供理论依据。……