多重荧光定量PCR法快速鉴定MRSA的临床研究

赵峻英，席家庄，谢铌奇，潘莉娟，王 杉，董 剑

重庆市大足区人民医院检验科，重庆 402360

金黄色葡萄球菌(SA)广泛存在于自然界中，是革兰阳性菌的代表，也是人类的一种重要病原菌，可引起严重的感染性疾病。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)是SA中的独特菌株，对所有青霉素和几乎所有β-内酰胺类抗菌药物耐药，甚至可能对四环素类、氨基糖苷类、大环内酯类等抗菌药物多重耐药，是引起院内和社区感染的重要病原菌之一，严重威胁人类的健康，成为当今感染医学中的一个难题[1]。因此，高效、灵敏、准确的MRSA检测手段，对于MRSA的早期诊断和精准治疗，以及有效预防和控制MRSA传播至关重要。本研究拟建立单管多通道的Taqman探针荧光定量PCR检测法，直接检测患者标本或临床培养的菌株中的nuc基因及mecA基因，并与传统细菌培养和鉴定方法进行比较，以评估多重荧光定量PCR检测法在快速鉴定MRSA中的应用价值，现报道如下。

1 材料与方法

1.1标本及菌株来源 收集2019年1-12月于本院就诊的疑似MRSA感染的患者送检标本共169例，其中痰液55例(32.54%)、尿液10例(5.92%)、脓液43例(25.44%)、分泌物46例(27.22%)、血液5例(2.96%)、灌洗液4例(2.37%)、棉拭子6例(3.55%)。菌株为随机抽取的本院2014年10月至2019年10月保存的SA共156株，均经全自动细菌鉴定仪鉴定，其中MRSA 106株(67.95%)，甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(MSSA)50株(32.05%)。

1.2仪器与试剂 VITEK2 Compact全自动细菌鉴定分析系统及配套细菌鉴定卡、5%CO2恒温培养箱，郑州安图生物工程股份有限公司的哥伦比亚血平板、麦康凯、巧克力及其他平板，英国Oxoid公司的K-B法药敏纸片，SA质控标准菌株(ATCC25923、ATCC29213)购自重庆市临床检验中心。……