蛹虫草遗传多样性分析

李 跃 刘 娜 宋 莹 张季军 李 红 肖千明

（辽宁省农业科学院食用菌研究所/辽宁省食用菌优质栽培重点实验室，辽宁沈阳110161）

蛹虫草（Cordyceps militaris）属子囊菌门，肉座菌目，虫草科，虫草属，又名北冬虫夏草、北虫草，是虫草属的模式种[1]。研究证明，蛹虫草含有虫草素、虫草酸及多糖等特殊活性物质，具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤、抗氧化、抗炎和免疫调节等诸多生理功效，被用作冬虫夏草的替代品[2]。酯酶同工酶是食用菌种质资源研究的生化指标之一，可反映出生物间的遗传信息和进化关系，可作为传统生物学分类的辅助依据[3]。笔者用酯酶同工酶技术对12个蛹虫草菌株的亲缘关系进行分析，旨在为蛹虫草菌种管理和种质资源遗传多样性的研究提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 供试菌株与培养基

供试的12个蛹虫草菌株采用组织分离获得，编号为C1～C12。

固体培养基配方：马铃薯200 g，葡萄糖20 g，磷酸二氢钾3 g，硫酸镁1.5 g，琼脂20 g，蛋白胨10 g，水1 000 mL。

液体菌种培养基配方：马铃薯200 g，葡萄糖20 g，磷酸二氢钾3 g，硫酸镁1.5 g，维生素B110 mg，蛋白胨3 g，牛肉膏5 g，水1 000 mL。

表1 供试蛹虫草菌株编号及来源

栽培种培养基配方：每瓶装40 g小麦，加入营养液60 mL。

1.2 试验方法

1.2.1 菌丝培养特性试验

用直径6 mm 打孔器取活化后的菌种块接种于直径9 cm 的固体培养基平板上，置于培养箱内（23±1）℃避光培养。观察菌丝长势以及菌丝转色后的颜色，并计算菌丝平均生长速度[4]。

菌丝平均长速（mm/d）=（[菌落直径-6）÷2]÷培养时间

1.2.2 收集菌丝

将活化后的菌种在无菌条件下接入20 mm×200 mm的试管中，每个菌株8支，置于（23±1）℃培养箱内，避光培养，待菌丝长满试管后将菌丝慢慢刮下，注意菌丝不带有培养基，以免影响后期的试验数据。……