灵芝杂交育种优势亲本筛选试验

李希政 白中文 朱 琳 夏宏志

（吉林省生物研究所，吉林长春130012）

灵芝是我国从古至今常用的中药材，在我国已有两千多年的药用历史，被视为能治百病的“仙草”[1]。吉林省长白山区的红灵芝誉满海内外[2]。自20世纪90年代开始，灵芝棚栽技术发展迅速。虽然灵芝栽培技术不断进步，但栽培菌株较杂[3]，并随着转代次数的增加，使用时间过长，出现了老化、退化、抗杂能力弱等问题[4]。杂交育种是新菌株选育的重要手段，而杂交亲本性状优选试验是杂交选育的关键。

1 材料与方法

1.1 供试灵芝菌株

试验灵芝菌株共计10个，均来自长白山菌株资源库，其中包括采集的野生灵芝（编号为CJ12）（表1）。所有菌株均通过分离、提纯、复壮，恢复至其最好性状。试验过程均采用菌龄相同的菌株且保证菌种管无污染。

1.2 供试培养基（料）配方

（1）母种培养基：马铃薯200 g，五维葡萄糖20 g，琼脂25 g，磷酸二氢钾3.5 g，硫酸镁1.5 g，蛋白胨 5 g，加水 1 000 mL，pH 自然。（2）原种培养料：杂木屑78%，麸皮15%，玉米粉5%，稻壳粉1%，石膏1%。（3）栽培灵芝木段：栽培木段选用新鲜枝条（经济林可砍伐硬木），将其截成同一长度段，捆成直径25 cm、高22 cm 的圆木段状，外包聚丙烯膜，常压灭菌12 h后备用。

表1 供试灵芝亲本菌株名称及来源

1.3 试验方法

1.3.1 母种菌丝比较试验

母种培养基按配方制作后装入试管，灭菌后，将其摆成长度为7 cm的斜面。每一菌株10支试管，每支试管接种0.5 cm2菌块。培养条件为27 ℃恒温。培养24 h 后观察各试管中菌丝的萌发情况和生长状态。当菌丝进入快速生长阶段时，每两天测一次长度，取平均值。……